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猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
引用本文:元永平,丛丽媛,陈德坤,蒋智勇,张春红,宋长绪.猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J].西北农业学报,2008,17(1):15-19.
作者姓名:元永平  丛丽媛  陈德坤  蒋智勇  张春红  宋长绪
作者单位:1. 西北农林科技大学,陕西杨凌,712100;广东省农科院兽医研究所,广东广州,510640
2. 西北农林科技大学,陕西杨凌,712100
3. 广东省农科院兽医研究所,广东广州,510640
基金项目:国家食品安全重大专项(2001BA804A31);广东省农业科技攻关(2003B21404、20052490100和2006B20301013);广东省自然科学基金(04002083);广东省自然基金重点项目(06105311)资助.
摘    要:以纯化复性的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap重组蛋白作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,获得了3株分泌PCV2-Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1C7A4、4F3F5和4G8F7,其染色体平均数为98~103,间接ELISA检测3株细胞培养上清效价分别为1:3125、1:3125、1:15625,小鼠腹水效价分别为1:390000、1:390000、1:1950000.ELISA结果显示,1C7A4、4F3F5和4G87F仅与融合表达的PCV2-Cap蛋白反应,而与PET-32a载体表达的蛋白不反应.相加ELISA结果显示3株单克隆抗体对应两个不同的病毒抗原位点.间接免疫荧光结果显示,1C7A4、4F3F5和4G8F7能与PCV2发生反应,而不与PCV1发生交叉反应.结果表明所获得的3株单抗是PCV2型特异性的,为PCV1和PCV2鉴别诊断方法的建立奠定了基础.

关 键 词:猪圆环病毒Ⅱ型  ORF2重组蛋白  单克隆抗体  病毒  蛋白  单克隆抗体  Protein  Monoclonal  Antibodies  Characterization  诊断方法  鉴别  型特异性  单抗  交叉反应  发生  间接免疫荧光  抗原位点  对应  载体表达  融合表达  显示  结果  水效
文章编号:1004-1389(2008)01-0015-05
收稿时间:2007-08-29
修稿时间:2007-09-21

Preparation and Characterization of Monoclonal Antibodies against PCV2-Cap Recombiant Protein
YUAN Yong-ping,CONG Li-yuan,CHEN De-kun,JIANG Zhi-yong,ZHANG Chun-hong and SONG Chang-xu.Preparation and Characterization of Monoclonal Antibodies against PCV2-Cap Recombiant Protein[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2008,17(1):15-19.
Authors:YUAN Yong-ping  CONG Li-yuan  CHEN De-kun  JIANG Zhi-yong  ZHANG Chun-hong and SONG Chang-xu
Institution:Northwest A & F University, Yangling Shaanxi 712100, China;Veterinary Medicine Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China;Northwest A & F University, Yangling Shaanxi 712100, China;Northwest A & F University, Yangling Shaanxi 712100, China;Veterinary Medicine Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China;Veterinary Medicine Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China;Veterinary Medicine Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China
Abstract:
Keywords:PCV2  ORF2 recombinant protein  Monoclonal antibodies
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