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样本数量和终质量浓度对DNA混合池PCR扩增质量和测序效果的影响
引用本文:徐建峰,容维中,石福岳,王燕燕,董 和,高 博,张艳丽,李振明. 样本数量和终质量浓度对DNA混合池PCR扩增质量和测序效果的影响[J]. 西北农业学报, 2019, 28(5): 681-685
作者姓名:徐建峰  容维中  石福岳  王燕燕  董 和  高 博  张艳丽  李振明
作者单位:(1.甘肃省畜牧兽医研究所,甘肃平凉 744000;2.平凉市农产品质量安全检测检验中心,甘肃平凉 744000;3.宁县畜牧兽医局,甘肃宁县 745200)
基金项目:甘肃省重点研发计划-农业类(17YF1NL052)。
摘    要:为筛选适宜的DNA混合池法,采用两因素交叉分组设计,以混合样本数量(20、60和150个)和终质量浓度(50、100和150 ng/μL)为组合因子,分析不同混合池对PCR扩增质量及SNPs检出率的影响。结果表明:在同一混合样本数量下,以终质量浓度100 ng/μL建立的DNA混合池扩增的PCR产物纯度和OD_(260)/OD_(280)均优于50 ng/μL,但对测序结果无显著影响;以终质量浓度150 ng/μL建立的DNA混合池扩增的PCR产物杂带较多,不符合测序要求。在同一混合样本终质量浓度下,混合样本数越多,SNPs检出率越高。综上,从PCR扩增质量、SNPs检出率和试验成本来分析,以混合样本150个、终质量浓度100 ng/μL组合建立的DNA混合池效果最好。

关 键 词:DNA混合池;样本数量;终质量浓度;早胜牛;PCR扩增;SNPs

Effects of Sample Numbers and Final Mass Concentration on PCR Amplification Quality and Sequencing Result with DNA Mixing Pool
XU Jianfeng,RONG Weizhong,SHI Fuyue,WANG Yanyan,DONG He,GAO Bo,ZHANG Yanli and LI Zhenming. Effects of Sample Numbers and Final Mass Concentration on PCR Amplification Quality and Sequencing Result with DNA Mixing Pool[J]. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 2019, 28(5): 681-685
Authors:XU Jianfeng  RONG Weizhong  SHI Fuyue  WANG Yanyan  DONG He  GAO Bo  ZHANG Yanli   LI Zhenming
Abstract:
Keywords:DNA mixing pool   Sample numbers   Final mass concentration   Zaosheng cattle   PCR amplification   SNPs
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