| 抗重金属Cr3+单克隆抗体的研制及其免疫学特性分析 |
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| 引用本文： | 王亚楠,丁 菡,王晓斐,雷 壮,牛琳琳,王自良.抗重金属Cr3+单克隆抗体的研制及其免疫学特性分析[J].西北农业学报,2016,25(11):1597-1602. |
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| 作者姓名： | 王亚楠 丁 菡 王晓斐 雷 壮 牛琳琳 王自良 |
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| 作者单位： | （1.河南科技学院 动物科学学院，河南新乡 453003; 2. 河南科技学院 新科学院，河南新乡 453003） |
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| 基金项目： | “十二五”国家科技支撑计划（2011BAK10B01-15)。 |
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| 摘 要： | 旨在研制敏感、特异、稳定的抗Cr~(3+)单克隆抗体(Cr~(3+)mAb)。用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cr~(3+)形成Cr~(3+)-ITCBE半抗原,异硫氰酯法制备人工免疫原Cr~(3+)-ITCBE-BSA和检测抗原Cr~(3+)-ITCBE-OVA,紫外扫描法(UV)、凝胶电泳法(SDS-PAGE)和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICPAES)进行免疫原鉴定;用Cr~(3+)-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立Cr~(3+)mAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备Cr~(3+)mAb,并对其免疫学特性进行分析。结果表明,免疫原制备成功,Cr~(3+)-ITCBE-BSA中Cr~(3+)和BSA的质量浓度分别为140.8mg/L和5.81g/L,筛选出2A3C11、2A3D9、2A11G5 3株杂交瘤细胞,其中最好的2A11G5间接ELISA效价细胞培养上清为1∶(2.56×103)、腹水为1∶(5.12×105),同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.69×109 L/mol,对Cr~(3+)的半数抑制质量浓度(IC50)为16.6μg/L,与其他重金属离子无交叉反应。表明成功研制亲和力高、特异性强、稳定性好的Cr~(3+)mAb,为铬离子残留免疫学检测方法的建立奠定基础。
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| 关 键 词： | Cr3+ 人工免疫原 单克隆抗体 免疫学特性 |
Preparation of Anti-Chromium Ion Monoclonal Antibodies and Analysis of Immunological Properties |
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| WANG Yanan,DING Han,WANG Xiaofei,LEI Zhuang,NIU Linlin and WANG Ziliang.Preparation of Anti-Chromium Ion Monoclonal Antibodies and Analysis of Immunological Properties[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2016,25(11):1597-1602. |
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| Authors: | WANG Yanan DING Han WANG Xiaofei LEI Zhuang NIU Linlin and WANG Ziliang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chromium ion Artificial immunogen Monoclonal antibody Immunological properties |
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