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绵羊Spry4基因的克隆、真核表达及序列分析
引用本文:袁 枫,陈 磊,玛依拉,李文蓉.绵羊Spry4基因的克隆、真核表达及序列分析[J].西北农业学报,2015,24(9):16-22.
作者姓名:袁 枫  陈 磊  玛依拉  李文蓉
作者单位:(1.新疆农业大学 农学院,乌鲁木齐 830000;2.新疆畜牧科学院 生物技术研究所,农业部草食家畜繁育生物技术重点开放实验室,自治区重点实验室,乌鲁木齐 830000)
基金项目:国家自然科学联合基金(U1303284);863计划(2013AA102506)。
摘    要:为探究Spry4在绵羊毛囊发育过程中的作用,以美利奴羊皮肤组织总RNA的反转录产物为模板,采用PCR技术扩增获得Spry4基因全长编码区,并克隆至pCRTMBluntⅡ-TOPT@vector载体进行测序。随后将ToPo-Spry4亚克隆至pcDNA3.0真核表达载体,再经脂质体转染至293T细胞表达,通过Western Blot鉴定表达产物,分析Spry4核酸和氨基酸序列。结果表明,首次克隆获得绵羊Spry4基因编码序列(GenBank登录号KP280032),序列长954bp,编码298个氨基酸,与其他哺乳动物氨基酸同源性达91%以上;预测Spry4蛋白不存在信号肽和跨膜结构域;Western Blot检测显示,重组表达的蛋白分子质量为36ku,与预期一致。

关 键 词:Spry4基因  美利奴羊  真核表达

Cloning, Eukaryotic Expression and Analysis of Spry4 Gene in Sheep
YUAN Feng,CHEN Lei,Mayila and LI Wenrong.Cloning, Eukaryotic Expression and Analysis of Spry4 Gene in Sheep[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2015,24(9):16-22.
Authors:YUAN Feng  CHEN Lei  Mayila and LI Wenrong
Abstract:
Keywords:Spry4 gene  Merino Sheep  Eukaryotic expression
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