| 巴什拜羊重组BPI蛋白的体外功能检测 |
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| 引用本文： | 陈冬梅,沈 文,刘 恺,郭海英,张晓丽,陈凯丽,孙延鸣.巴什拜羊重组BPI蛋白的体外功能检测[J].西北农业学报,2015,24(10):10-16. |
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| 作者姓名： | 陈冬梅 沈 文 刘 恺 郭海英 张晓丽 陈凯丽 孙延鸣 |
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| 作者单位： | （1.石河子大学 动物科技学院，新疆石河子 832003；2.乌鲁木齐市动物园，乌鲁木齐 830094; 3.石河子大学 生命科学学院，新疆石河子 832003） |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31160525）。 |
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| 摘 要： | 研究巴什拜羊重组杀菌性/通透性增加蛋白(recombinant bectericidal/permeability increasing protein,rBPI)的体外生物学特性。向体外培养的鼠脑内皮细胞MBECs(mouse brain endothelial cell)中加入rBPI,利用Annexin V FITC/PI染色法在荧光显微镜下鉴定凋亡细胞,再用琼脂糖凝胶电泳观察DNA ladder,以检测rBPI诱导MBECs凋亡的作用;在体外培养的绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)中加入rBPI,利用real-time PCR技术检测rBPI对MO的抑制作用;在体外培养的大肠杆菌中加入rBPI,利用微量肉汤稀释法检测rBPI的抑菌作用;在体外培养的绵羊中性粒细胞中加入MO,利用real-time PCR技术检测BPI mRNA的表达水平。结果表明,Annexin V FITC/PI染色法可观察到凋亡早期细胞呈绿色,凋亡晚期或死亡细胞呈红色,在540nmol/L rBPI浓度诱导作用下可见清晰的DNA ladder条带;rBPI作用于MO3h时,MO16SrRNA表达水平显著低于对照组(P0.05);20、40和80mg/L的rBPI与阳性对照组相比均能够显著抑制大肠杆菌的生长(P0.05);绵羊中性粒细胞受到MO感染后3h和4h时表达BPI mRNA的水平均显著高于对照组(P0.05)。
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| 关 键 词： | 杀菌性/通透性增加蛋白 巴什拜羊 体外功能 细胞凋亡 绵羊肺炎支原体 大肠杆菌 |
Function of Recombinant BPI Protein of Bashiby Sheep in Vitro |
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| CHEN Dongmei,SHEN Wen,LIU Kai,GUO Haiying,ZHANG Xiaoli,CHEN Kaili and SUN Yanming.Function of Recombinant BPI Protein of Bashiby Sheep in Vitro[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2015,24(10):10-16. |
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| Authors: | CHEN Dongmei SHEN Wen LIU Kai GUO Haiying ZHANG Xiaoli CHEN Kaili and SUN Yanming |
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