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沙门菌、巴氏杆菌和大肠埃希菌多重PCR检测方法的建立
引用本文:安俊卿,张红垒,童德文,许信刚.沙门菌、巴氏杆菌和大肠埃希菌多重PCR检测方法的建立[J].西北农业学报,2013,22(7):24-29.
作者姓名:安俊卿  张红垒  童德文  许信刚
作者单位:(西北农林科技大学 动物医学院,陕西杨凌 712100)
基金项目:国家级大学生创新创业训练计划项目(1210712042)。
摘    要:旨在建立一种可以应用于临床样本同时检测沙门菌、多杀性巴氏杆菌和大肠埃希菌感染的多重PCR方法。根据NCBI上已收录的沙门菌hut基因、多杀性巴氏杆菌 kmt1基因和大肠埃希菌23SrRNA基因的全基因序列,设计并合成3对特异性引物,通过优化多重PCR反应条件,建立能够同时检测3种细菌混合感染的多重PCR诊断方法。特异性分析表明,应用该方法可以从沙门菌、多杀性巴氏杆菌和大肠埃希菌以及3种细菌的混合物中扩增出3条大小分别为286 bp、457 bp和652 bp的特异性条带,其他对照组检测结果均为阴性;敏感性分析表明,该方法对沙门菌、多杀性巴氏杆菌和大肠埃希菌的最低检出量分别为1.77×10 、1.99×10 、2.01×10  CFU/mL;人工模拟感染样本检测表明,该方法能从混合感染的病料中检测出3种病原菌。可见:所建立的多重PCR方法具有特异性强,敏感度高,稳定性好的特点,可以有效检测沙门菌、多杀性巴氏杆菌和大肠埃希菌的混合感染。

关 键 词:沙门菌  巴氏杆菌  大肠埃希菌  多重PCR

Establishment of Multiplex PCR Detection Method for Salmonella, Pasteurella and Escherichia coli
AN Junqing,ZHANG Honglei,TONG Dewen and XU Xingang.Establishment of Multiplex PCR Detection Method for Salmonella, Pasteurella and Escherichia coli[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2013,22(7):24-29.
Authors:AN Junqing  ZHANG Honglei  TONG Dewen and XU Xingang
Abstract:
Keywords:Salmonella spp  Pasteurella  Escherichia coli  Multiplex PCR
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