| A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达纯化及活性检测 |
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| 引用本文： | 刘 畅,卢清侠,杨继飞,王世红,王寅彪,郭官鹏,邓瑞广,张改平.A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达纯化及活性检测[J].西北农业学报,2013,22(9):7-12. |
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| 作者姓名： | 刘 畅 卢清侠 杨继飞 王世红 王寅彪 郭官鹏 邓瑞广 张改平 |
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| 作者单位： | （1.河南农业大学 牧医工程学院，郑州 450002；2.河南省农业科学院 农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室，郑州 450002） |
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| 基金项目： | NSFC 河南人才培养联合基金 (U1204327)；河南省级重点实验室建设专项（122300413217）。 |
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| 摘 要： | 为获得具有活性的A型FMDV VP1蛋白，以A型vp1重组质粒pMD19T A vp1为模板，利用PCR扩增得到A型FMDV vp1基因片段，将此基因片段与原核表达载体pET28a连接，构建重组质粒pET A vp1。经IPTG诱导表达含重组质粒pET A vp1的E. coli BL21 (DE3) 菌后，SDS PAGE显示VP1蛋白以包涵体形式获得高效表达，蛋白分子质量约为29 ku。通过对IPTG浓度及诱导时间进行优化，结果表明，在37 ℃条件下，IPTG终浓度为0.3 mmol/L，诱导表达6 h后，VP1蛋白的表达量最大。Western Blot分析表明，VP1重组蛋白能够被A型口蹄疫阳性血清特异性识别。ELISA检测结果显示，VP1包涵体蛋白经洗涤纯化，尿素浓度梯度透析复性后具有较高的活性。
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| 关 键 词： | A型口蹄疫病毒 VP1蛋白 原核表达 蛋白纯化 活性鉴定 |
Prokaryotic Expression and Activity Analysis of VP1 ofFoot and Mouth Disease Virus Serotype A |
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| LIU Chang,LU Qingxi,YANG Jifei,WANG Shihong,WANG Yinbiao,GUO Guanpeng,DENG Ruiguang and ZHANG Gaiping.Prokaryotic Expression and Activity Analysis of VP1 ofFoot and Mouth Disease Virus Serotype A[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2013,22(9):7-12. |
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| Authors: | LIU Chang LU Qingxi YANG Jifei WANG Shihong WANG Yinbiao GUO Guanpeng DENG Ruiguang and ZHANG Gaiping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Foot and mouth disease virus serotype A VP1 protein Prokaryotic expression Purification of protein Activity analysis |
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