鸡MHCⅡβ链基因的克隆和表达及其抗体制备 |
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引用本文: | 徐志本,余为一,仲大莲,李槿年,周杰.鸡MHCⅡβ链基因的克隆和表达及其抗体制备[J].安徽农业大学学报,2006,33(1):51-55. |
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作者姓名: | 徐志本 余为一 仲大莲 李槿年 周杰 |
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作者单位: | 1. 安徽农业大学动物科技学院,合肥,230036 2. 中国科技大学生命科学学院,合肥,230026 |
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摘 要: | 用自行设计的1对引物,通过RT-PCR从鸡脾细胞中分别克隆了鸡MHCⅡβ链基因片段,大小为798 bp.核苷酸测序结果表明,与已登录的基因序列同源性为95%.将该基因片段插入含谷胱甘肽(GST)基因的质粒pGEX-4T-1,构建了pGEX-4T-1-chMHCⅡβ.经诱导表达,获得分子大小约为53 000的融合蛋白,其中chMHCⅡβ链大小约27 000.经亲和层析,获得纯化GST-β融合蛋白,进一步用此蛋白免疫小鼠,制备了鼠源抗鸡MHCⅡβ链抗体.经过琼扩和ELISA检测,表明该融合蛋白具有良好的抗原性.
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关 键 词: | 鸡MHCⅡ β链基因 克隆 原核表达 |
文章编号: | 1672-352X(2006)01-0051-05 |
收稿时间: | 2005-10-06 |
修稿时间: | 2005年10月6日 |
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