| 稻褐飞虱羧酸酯酶基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 吴岩,王文兵,许晓风.稻褐飞虱羧酸酯酶基因的克隆与表达[J].安徽农业大学学报,2006,33(4):513-516. |
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| 作者姓名： | 吴岩 王文兵 许晓风 |
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| 作者单位： | 1. 南京师范大学生命科学学院,南京,210097
2. 江苏大学生命科学研究院,镇江,212013 |
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| 摘 要： | 以稻褐飞虱的cDNA为模板,进行PCR扩增,获得约1 900 bp的DNA片段.通过T-A克隆,将PCR产物插入pMD18-T载体中.再以此重组载体为模板,以羧酸酯酶成熟蛋白基因(cae-M)的特异性引物进行PCR扩增.将cae-M扩增产物和pET28a分别用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,酶切产物纯化后在T4连接酶作用连接成重组表达载体pET28a-cae-M.将pET28a-cae-M转化BL21(DE3),经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约62 kD外源蛋白带.蛋白质印迹分析表明,该外源蛋白与6×His融合表达.
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| 关 键 词： | 稻褐飞虱 羧酸酯酶 克隆 原核表达 稻褐飞虱 羧酸酯酶基因 克隆与表达 Escherichia coli brown planthopper expression 融合表达 外源蛋白 分析表 蛋白质 白带 IPTG 转化 重组表达载体 连接酶 作用 产物纯化 双酶切 扩增产物 特异性引物 |
| 文章编号： | 1672-352X（2006）04-0513-04 |
| 收稿时间： | 2005-05-05 |
| 修稿时间： | 2005-05-05 |
Cloning and expression of brown planthopper carboxylesterase in Escherichia coli |
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| WU Yan,WANG Wen-bing,XU Xiao-feng.Cloning and expression of brown planthopper carboxylesterase in Escherichia coli[J].Journal of Anhui Agricultural University,2006,33(4):513-516. |
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| Authors: | WU Yan WANG Wen-bing XU Xiao-feng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | brown planthopper carboxylesterase cloning porkaryotic expression |
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