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基于谷氨酸棒状杆菌的茶氨酸生物合成工程菌构建
引用本文:江丽娜,王荣秀,贾慧艳,邓威威,张正竹.基于谷氨酸棒状杆菌的茶氨酸生物合成工程菌构建[J].安徽农业大学学报,2018,45(5):808-812.
作者姓名:江丽娜  王荣秀  贾慧艳  邓威威  张正竹
作者单位:安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室,合肥,230036;安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室,合肥,230036;安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室,合肥,230036;安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室,合肥,230036;安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室,合肥,230036
基金项目:国家自然科学基金项目(31300576)资助。
摘    要:将茶树谷氨酰胺合成酶基因(CsGS1;3,GenBank登录号AB117934.1)克隆,并与穿梭表达载体pZ8-1连接,将重组质粒通过电转法转到谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032感受态细胞,构建了谷氨酸棒状杆菌重组菌株Corynebacterium glutamicum ATCC 13022/pZ8-CsGS1;3。再将成功构建的该重组菌株经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在30℃下诱导4 h后,进行体外酶活反应。反应产物用薄层层析(TLC)检测发现有产物茶氨酸生成,经液相色谱三重四级杆串联色谱仪(LC-MS)进一步检测确定其合成产物为茶氨酸。

关 键 词:茶氨酸  基因克隆  谷氨酸棒状杆菌ATCC  13032  体外合成  酶活性
收稿时间:2018/1/10 0:00:00

Construction of theanine biosynthesis engineering bacteria based on Corynebacterium glutamicum
JIANG Lin,WANG Rongxiu,JIA Huiyan,DENG Weiwei and ZHANG Zhengzhu.Construction of theanine biosynthesis engineering bacteria based on Corynebacterium glutamicum[J].Journal of Anhui Agricultural University,2018,45(5):808-812.
Authors:JIANG Lin  WANG Rongxiu  JIA Huiyan  DENG Weiwei and ZHANG Zhengzhu
Institution:State Key Laboratory of Tea Plant Biology and Utilization, Anhui Agricultural University, Hefei 230036,State Key Laboratory of Tea Plant Biology and Utilization, Anhui Agricultural University, Hefei 230036,State Key Laboratory of Tea Plant Biology and Utilization, Anhui Agricultural University, Hefei 230036,State Key Laboratory of Tea Plant Biology and Utilization, Anhui Agricultural University, Hefei 230036 and State Key Laboratory of Tea Plant Biology and Utilization, Anhui Agricultural University, Hefei 230036
Abstract:
Keywords:theanine  gene clone  Corynebacterium glutamicum ATCC 13032  in vitro synthesis  enzymatic activity
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