| 草鱼呼肠孤病毒RT-PCR检测方法的建立及临床应用 |
| |
| 引用本文： | 王晓丰,薛晖,丁正峰,唐建清,夏爱军.草鱼呼肠孤病毒RT-PCR检测方法的建立及临床应用[J].浙江农业学报,2012,24(2):213-216. |
| |
| 作者姓名： | 王晓丰 薛晖 丁正峰 唐建清 夏爱军 |
| |
| 作者单位： | 1. 江苏省淡水水产研究所,江苏南京,210017
2. 江苏省淡水水产研究所,江苏南京210017;国家大宗淡水鱼类产业技术体系南京综合试验站,江苏南京210017 |
| |
| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS4631) |
| |
| 摘 要： | 为了解草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)的感染流行情况及早期临床诊断的需要,研究并建立了该病毒的RT-PCR检测方法。根据GenBank中GCRV VP6蛋白基因保守序列设计引物,以GCRV弱毒疫苗株GCHV-892总RNA为模板,RT-PCR反应扩增出712 bp的目的条带,并对PCR反应体系和反应程序进行了优化,测定了该方法的敏感性和特异性。敏感性试验结果表明以含VP6蛋白基因的重组质粒为模板,该PCR方法的最低检测限为102copies.μL-1,特异性试验表明该引物仅能扩增GCRV核酸,而与白斑综合征病毒(WSSV)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、病毒性神经坏死病毒(VNNV)无交叉反应性。应用所建立的RT-PCR方法检测了7份疑似出血病草鱼病样,3份病料获得了阳性扩增,随机挑选其中的1份阳性样品经克隆后测序,结果显示与GenBank中已知序列最高有99%的相似性。
|
| 关 键 词： | 草鱼出血病 呼肠孤病毒 RT-PCR 检测方法 |
Development and clinical application of RT-PCR method for grass carp reovirus |
| |
| WANG Xiao-feng
,
XUE Hui
,
DING Zheng-feng
,
TANG Jian-qing
,
XIA Ai-jun.Development and clinical application of RT-PCR method for grass carp reovirus[J].Acta Agriculturae Zhejiangensis,2012,24(2):213-216. |
| |
| Authors: | WANG Xiao-feng XUE Hui DING Zheng-feng TANG Jian-qing XIA Ai-jun |
| |
| Institution: | 1,2,(1Freshwater Fisheries Research Institute of Jiangsu Province,Nanjing 210017,China;2Nanjing Integrated Station for System of Industrial Technology of National Dominant Freshwater Fishes,Nanjing 210017,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
