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鸭坦布苏病毒E基因的克隆表达及初步应用
引用本文:杨少艳,于可响,王华,史玉颖,马秀丽,李建亮,崔言顺.鸭坦布苏病毒E基因的克隆表达及初步应用[J].浙江农业学报,2012,24(5):782-786.
作者姓名:杨少艳  于可响  王华  史玉颖  马秀丽  李建亮  崔言顺
作者单位:1. 山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;山东省农业科学院家禽研究所,山东省家禽疫病诊断与免疫重点实验室,山东济南250023
2. 山东省农业科学院家禽研究所,山东省家禽疫病诊断与免疫重点实验室,山东济南250023
3. 山东农业大学动物科技学院,山东泰安,271018
基金项目:山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目
摘    要:利用PCR方法从鸭坦布苏病毒山东分离株(BZ株)扩增整个E基因,全长1 503 bp,克隆到pMD18-T载体中,然后将双酶切目的片段亚克隆入pET-28a(+)载体,构建出重组表达质粒PET28a-E。将PET28a-E转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导可表达出分子量约54.8 kD的蛋白,Western blotting试验呈阳性,表明E蛋白有很好的反应原性。以纯化的表达产物作为包被抗原,鸭坦布苏病毒血清为一抗,HRP标记的羊抗鸭IgG为二抗建立间接ELISA方法。采用该方法对80份送检鸭血清进行检测,并与中和试验进行比较,结果显示,两者的符合率为95.0%,表明该方法具有较好的应用前景。

关 键 词:鸭坦布苏病毒  E基因  表达  间接ELISA

Cloning and expression of E gene of duck Tembusu virus and preliminary application
YANG Shao-yan , YU Ke-xiang , WANG Hua , SHI Yu-ying , MA Xiu-li , LI Jian-liang , CUI Yan-shun.Cloning and expression of E gene of duck Tembusu virus and preliminary application[J].Acta Agriculturae Zhejiangensis,2012,24(5):782-786.
Authors:YANG Shao-yan  YU Ke-xiang  WANG Hua  SHI Yu-ying  MA Xiu-li  LI Jian-liang  CUI Yan-shun
Institution:1,*(1College of Animal Science &Veterinary Medicine,Shandong Agricultural University,Tai′an 271018,China;2Institute of Poultry Science,Shandong Academy of Agricultural Science,Jinan 250023,China)
Abstract:
Keywords:
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