| 狂犬病毒CVS株G基因和N基因共表达重组腺病毒载体的构建 |
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| 引用本文： | 李江涛,殷相平,张金卫,丁农,柳纪省.狂犬病毒CVS株G基因和N基因共表达重组腺病毒载体的构建[J].浙江农业学报,2011,23(3). |
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| 作者姓名： | 李江涛 殷相平 张金卫 丁农 柳纪省 |
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| 作者单位： | 1. 湖州市农业科学研究院,浙江湖州,313000
2. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,农业部草食动物疫病重点开放实验室,甘肃兰州730046 |
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| 摘 要： | 通过引入内部核糖体进入位点序列,构建狂犬病毒G基因和N基因共表达的腺病毒载体.通过RTPCR方法扩增得到RVG基因、N基因.N基因先亚克隆入pIRES质粒;G基因经Kpn Ⅰ和Mlu Ⅰ,pIRES-N质粒经Mlu Ⅰ、Not Ⅰ双酶切,回收目的基因后与经Kpn Ⅰ和Not Ⅰ双酶切处理的腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,再与pAdEasy-1质粒在BJ5183菌中同源重组产生腺病毒载体质粒.线性化后的重组腺病毒质粒转染293细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达鉴定重组的腺病毒,RT-PCR法检测狂犬病毒精蛋白和核蛋白基因片段.该重组病毒质粒经酶切鉴定与预期结果一致;转染293细胞后观察到绿色荧光蛋白的表达;RT-PCR法可检测到糖蛋白和核蛋白基因片段.试验成功构建了G和N双基因共表达重组腺病毒载体,为狂犬病活载体疫苗的研制提供了依据.
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| 关 键 词： | 狂犬病病毒G基因 N基因 内部核糖体进入位点序列 重组腺病毒 |
Construction of recombinant adenoviral vector co-expressing G and N gene of rabies virus |
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| LI Jiang-tao,YIN Xiang-ping,ZHANG Jin-wei,DING Nong,LIU Ji-xing.Construction of recombinant adenoviral vector co-expressing G and N gene of rabies virus[J].Acta Agriculturae Zhejiangensis,2011,23(3). |
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| Authors: | LI Jiang-tao YIN Xiang-ping ZHANG Jin-wei DING Nong LIU Ji-xing |
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| Institution: | LI Jiang-tao1,YIN Xiang-ping2,ZHANG Jin-wei1,DING Nong1,LIU Ji-xing2,(1Huzhou Academy of Agriculture Sciences,Huzhou 313000,China,2Key Laboratory of Animal Virology of Ministry of Agriculture,State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology,Key Laboratory of Grazing Animal Diseases of Ministry of Agriculture,Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730046,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | G gene of rabies virus N gene IRES recombinant adenovirus |
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