鸭肠炎病毒强毒和疫苗弱毒鉴别诊断PCR方法的建立 |
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引用本文: | 万春和,刘荣昌,陈翠腾,程龙飞,傅光华,施少华,陈红梅,傅秋玲,黄瑜.鸭肠炎病毒强毒和疫苗弱毒鉴别诊断PCR方法的建立[J].福建农业学报,2018(3). |
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作者姓名: | 万春和 刘荣昌 陈翠腾 程龙飞 傅光华 施少华 陈红梅 傅秋玲 黄瑜 |
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作者单位: | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室 |
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摘 要: | 为建立鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)强毒和疫苗弱毒的鉴别诊断方法,通过分析比较GenBank数据库中上传的DEV强毒株和疫苗弱毒株UL2基因核苷酸序列,分析DEV疫苗弱毒和DEV强毒在UL2基因上的核苷酸序列,利用引物设计软件Oligo 7.0,设计一组可对DEV强毒株和疫苗弱毒株UL2基因进行编码区全长扩增的特异性引物,经条件优化后建立DEV强毒和疫苗弱毒鉴别诊断的PCR方法。结果表明,DEV疫苗弱毒和DEV强毒在UL2基因上存在528bp的连续核苷酸序列缺失。优化后的PCR方法最佳退火温度为55℃,对DEV强毒和疫苗弱毒扩增片段大小分别为1 019bp和491bp;敏感性强,最低检测限为15.3pg;特异性好,对鸭源常见传染病(如番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鹅细小病毒、鸭源大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌和鸭源禽多杀性巴氏杆菌)均无特异性扩增。
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