| 果蔗SoSgt1基因的克隆表达与植物反义表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 林生,潘大仁,周以飞,陈观水,张绪璋,吴子峰.果蔗SoSgt1基因的克隆表达与植物反义表达载体的构建[J].热带生物学报,2010,1(1):1-7. |
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| 作者姓名： | 林生 潘大仁 周以飞 陈观水 张绪璋 吴子峰 |
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| 作者单位： | 林生,潘大仁,周以飞(福建省作物分子与细胞生物学重点实验室,福建农林大学,福建,福州,350002;作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室,福建农林大学,福建,福州,350002);陈观水,吴子峰(福建省作物分子与细胞生物学重点实验室,福建农林大学,福建,福州,350002);张绪璋(作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室,福建农林大学,福建,福州,350002) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，福建省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 利用不同作物的Sgt1基因的SGS保守区域的氨基酸保守位点设计简并引物,从果蔗的cDNA中克隆分离出果蔗SoSgt1基因片段。以果蔗SoSgt1基因片段为探针,利用电子克隆和序列拼接方法并通过RT-PCR验证获得了一个全长1438bp的cDNA序列。通过ORF软件分析,预测得到的蛋白质具有362个氨基酸。利用NCBI数据库中的Protein Blast分析SoSgt1蛋白氨基酸序列,得出含有SGT1蛋白的3个典型的保守结构域(TPR,CS和SGS),与其他作物的SGT1蛋白比较具有较高的相似性。利用梢腐病病原Gibberella fujikuroi接种福安果蔗叶片,检测到SoSgt1基因的转录水平逐渐提高,并用果蔗SoSgt1基因的cDNA片段设计2个酶切位点,反向插入到植物真核表达载体pCAMBIA1301,构建反义表达载体pCAM-SGT。
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| 关 键 词： | 果蔗 SoSgt1基因 克隆 半定量RT-PCR 载体构建 |
Cloning of SoSgt1 from Chewing Cane and Construction of Antisense Vector |
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| LIN Sheng,PAN Da-ren,ZHOU Yi-fei,CHEN Guan-shui,ZHANG Xu-zhang,WU Zi-feng.Cloning of SoSgt1 from Chewing Cane and Construction of Antisense Vector[J].Journal of Tropical Biology,2010,1(1):1-7. |
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| Authors: | LIN Sheng PAN Da-ren ZHOU Yi-fei CHEN Guan-shui ZHANG Xu-zhang WU Zi-feng |
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| Institution: | LIN Sheng1,2,PAN Da-ren1,ZHOU Yi-fei1,CHEN Guan-shui1,ZHANG Xu-zhang2,WU Zi-feng1 (1. Key Laboratory of Crop Molecular and Cell Biology,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China,2. Key Laboratory of Ministry of Education of Genetics,Breeding and Multiple Utilization of Crops,China) |
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| Abstract: | Based on SGS conservative amino acid region of Sgt1 gene from different crops,degenerate primers were designed and RT-PCR was used to amplify SoSgt1 cDNA fragment of chewing cane. The results indicated that SoSgt1 full length cDNA from chewing cane includes 1438 bp,362 amino acids. Protein Blast from NCBI database was used to analysis its amino acid sequence,and the results showed that the SoSgt1 protein have three SGT1 typical conserved domains eg. TPR,CS and SGS,and the similarity among SGT1 of other crop... |
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| Keywords: | chewing cane SoSgt1 gene cloning semi-quantitative RT-PCR vector construction |
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