| 女贞RAPD-PCR实验条件的优化 |
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| 引用本文： | 赵峰,刘国民,李娟玲,张其文,符伟,张恩华.女贞RAPD-PCR实验条件的优化[J].热带生物学报,2014,5(4). |
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| 作者姓名： | 赵峰 刘国民 李娟玲 张其文 符伟 张恩华 |
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| 作者单位： | 1. 海南广播电视大学,海南,海口,570208
2. 海南大学苦丁茶研究所,海南,海口,570228 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，海南省教育厅基金资助项目 |
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| 摘 要： | 采用单因素梯度试验对影响女贞(Ligustrum lucidum Ait.)RAPD扩增的若干重要影响因素(包括Mg Cl2、d NTPs、随机引物、Taq DNA聚合酶浓度、模板DNA用量,以及退火温度与循环次数等)进行了优化。优化后的女贞RAPD-PCR反应体系为:每25μL体积中含10×反应buffer 2.5μL,2.5 mmol·L-1Mg Cl23.0μL,0.2 mmol·L-1d NTPs 0.5μL,2.0 U Taq酶0.4μL,0.4μmol·L-1引物1.0μL,DNA模板60 ng。PCR扩增程序:在94℃条件下预变性4 min,然后依次在94℃条件下变性30 s,38℃条件下退火45 s,72℃条件下延伸2 min;进行40个循环,最后在72℃条件下延伸10 min,并于16℃条件下保存。以该优化的RAPD反应体系对木犀科女贞属植物不同居群间的女贞种质材料的扩增,均能获得丰富而清晰的条带,且重现性好。
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| 关 键 词： | 女贞 RAPD 影响因子 体系优化 |
Optimization of the Experimental Conditions for RAPD-PCR of Ligustrum lucidum Ait. |
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| ZHAO Feng,LIU Guomin,LI Juanling,ZHANG Qiwen,FU Wei,ZHANG Enhua.Optimization of the Experimental Conditions for RAPD-PCR of Ligustrum lucidum Ait.[J].Journal of Tropical Biology,2014,5(4). |
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| Authors: | ZHAO Feng LIU Guomin LI Juanling ZHANG Qiwen FU Wei ZHANG Enhua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ligustrum lucidum Ait RAPD impact factors system optimization |
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