| 海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证 |
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| 引用本文： | 黄超,张丽丽,邓柳红,张春发.海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证[J].热带生物学报,2016(1):82-88. |
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| 作者姓名： | 黄超 张丽丽 邓柳红 张春发 |
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| 作者单位： | 1. 海南大学农学院,海南海口,570228;中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口,571101;海南省蛋白质工程药物重点实验室/海口市生命科学药物工程技术研究开发中心,海南海口,570311;2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口,571101;3. 海南省蛋白质工程药物重点实验室/海口市生命科学药物工程技术研究开发中心,海南海口,570311 |
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| 基金项目： | 海南省重大科技项目(ZDZX2013008-04-03)，海口市重点科技计划项目(2012-060)，国家自然科学基金项目(31101200) |
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| 摘 要： | 提取春季海南五指山美洲商陆叶片总RNA,利用RT-PCR技术获得c DNA,再根据Genbank上公布的PAP-Ⅰ基因序列设计引物扩增PAP-Ⅰ基因,并连接到p~(ET)-30a载体上进行表达,表达的产物以不溶的包涵体形式存在,经过变性、镍柱亲和层析纯化,纯化后的重组蛋白经过Western Blot验证表明该基因得到了正确表达,利用柱上循环复性后的重组PAP-Ⅰ蛋白经麦胚提取物转录/翻译偶联系统验证具有抑制蛋白质合成的活性。
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| 关 键 词： | 美洲商陆 抗病毒蛋白 载体构建 原核表达 海南五指山 |
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