| 鸭胚睾丸支持细胞的分离培养与鉴定 |
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| 作者单位： | ;1.广东省水禽健康养殖重点实验室;2.仲恺农业工程学院动物科技学院 |
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| 摘 要： | 为探究鸭胚睾丸支持细胞的分离培养方法,选取24日胚龄的麻鸭鸭胚40个,取出睾丸,采用胶原酶Ⅳ与胰蛋白酶二步消化分离睾丸细胞,差异贴壁与低渗处理的方法进行纯化,于37℃,体积分数5%二氧化碳条件下培养,最终得到纯度较高的支持细胞.经染色鉴定,发现罗丹明123染色显示支持细胞中富含线粒体;AKP检测发现80%的细胞呈AKP阴性;吖啶橙染色显示支持细胞细胞质中富含RNA;油红O染色显示睾丸支持细胞细胞质中含有大量脂肪滴,细胞核内可见双极小体.本试验结果说明采用胶原酶Ⅳ与胰蛋白酶结合消化,经差异贴壁与低渗出处理纯化,可得到较高纯度的支持细胞;结合罗丹明123染色法、AKP染色法、吖啶橙染色法与油红O染色法可有效鉴定支持细胞.
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| 关 键 词： | 鸭 睾丸 支持细胞 培养 鉴定 |
Isolation,culture and identification of testis sertoli cells from duck embryo |
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