| 脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶-1基因敲低人肺癌细胞A549构建及其对线粒体功能影响 |
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| 引用本文： | 许文亚,李春艳,林子英,王亚红,杨拉维,刘刚.脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶-1基因敲低人肺癌细胞A549构建及其对线粒体功能影响[J].湛江医学院学报,2017,35(2). |
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| 作者姓名： | 许文亚 李春艳 林子英 王亚红 杨拉维 刘刚 |
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| 作者单位： | 广东医科大学附属医院临床医学研究中心,广东湛江,524001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，广东省自然科学基金，广东医科大学科研基金面上培育项目，2017年度广东省医学科研基金 |
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| 摘 要： | 目的 建立脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶-1(APE1)基因敲低人肺癌细胞A549,并初步观察线粒体功能变化.方法 APE1基因shRNA序列与pSIREN-RetroQ慢病毒载体经酶切连接重组体(pSIREN-RetroQ-shAPE1),再与病毒包装质粒共转染293T细胞;收集病毒液并感染A549细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞株A549shAPE1.免疫印迹法检测稳定细胞株中APE1干扰效率.用双氧水处理A549 shCotrol和A549 shAPE1细胞24 h,分析细胞内ATP及活性氧(ROS)变化.结果 经PCR和测序鉴定成功构建重组慢病毒载体pSIREN-RetroQ-sh APE1,免疫印迹法证实A549 shControl和A549 shAPE1稳定细胞株构建成功;双氧水处理后,A549shAPE1细胞中ATP活性明显低于A549shControl细胞(P＜0.05),而ROS明显增加(P＜0.01).结论 APE1干扰可影响肺癌细胞中线粒体功能.
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| 关 键 词： | 酶脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶-1 A549细胞 活性氧 线粒体功能 |
Construction of APE1 gene knockdown in human lung cancer A549 cells and its effect on mitochondrial function |
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| XU Wen-ya,LI Chun-yan,LIN Zi-ying,WANG Ya-hong,YANG La-wei,LIU Gang.Construction of APE1 gene knockdown in human lung cancer A549 cells and its effect on mitochondrial function[J].Journal of Guangdong Medical College,2017,35(2). |
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| Authors: | XU Wen-ya LI Chun-yan LIN Zi-ying WANG Ya-hong YANG La-wei LIU Gang |
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