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马铃薯三种病毒的多重PCR检测方法构建(英文)
引用本文:乔楠,曹佳,李霞.马铃薯三种病毒的多重PCR检测方法构建(英文)[J].Agricultural Science&Technology,2011(8).
作者姓名:乔楠  曹佳  李霞
作者单位:榆林学院生命科学学院;北京真思维生物科技有限公司;陕西省榆林市农业科学研究所;
摘    要:目的]构建马铃薯A病毒(Potato virusA,PVA)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaicvirus,TMV)、马铃薯Y病毒(Potato virusY,PVY)3种马铃薯主要易受感染的病毒的多重PRC(multiplex PCR)检测方法。方法]根据GenBank公布的PVA、TMV、PVY基因序列分别设计引物,建立3种马铃薯病毒的多重PCR方法;通过构建3种病毒PCR扩增目的基因的质粒用于制备标准品进行敏感性验证,利用PVX(Potato virus X)、PVM(Potato virus M)、PVS(Potato virus S)、PVV(Potato virus V),CMV(Cucumber mosaic virus)等其他马铃薯病毒进行特异性试验;并对11份疑似发生病毒病的马铃薯块茎采集样品进行了检测。结果]研究中构建的马铃薯3种病毒多重PCR检测方法,最低检测下限:PVA为100落copies/2μl,PVY为100copies/2μl,TMV为1000copies/2μl,与PVX、PVM、PVV、PVS、CMV等其他马铃薯病毒无交叉反应,具有良好的特异性;11份疑似发生病毒病的马铃薯块茎中7份样品检出3种病毒感染阳性。结论]研究成功构建了马铃薯PVA、TMV、PVY病毒的多重PCR方法,为马铃薯病毒检测技术应用奠定一定基础。

关 键 词:马铃薯  PVA  TMV  PVY  多重PCR

Establishment of Multiplex PCR for Three Virus of Potato
QIAO Nan,CAO Jia,LI Xia .School of Life Science,Yulin University,Yulin.Establishment of Multiplex PCR for Three Virus of Potato[J].农业科学与技术(英文版),2011(8).
Authors:QIAO Nan  CAO Jia  LI Xia School of Life Science  Yulin University  Yulin
Institution:QIAO Nan1,CAO Jia2,LI Xia3 1.School of Life Science,Yulin University,Yulin 719000,2.Beijing Genes Way Co.,Ltd.,Beijing 100044,3.Yulin Institute of Agricultural Sciences
Abstract:Objective]The aim was to establish the multiplex PCR method for three virus of potato:PVA(potato virus A),TMV(Tobacco mosaic virus)and PVY(potato virus Y).Method]According to the PVA,TMV and PVY sequences available in GenBank,pairs of primer were designed for establishing a multiplex PCR method,and constructing recombinant plasmid of target genes by PCR amplified of three viruses as reference standard simple to be used in sensitivity test;PVX(Potato virus X),PVM(Potato virus M),PVS(Potato virus S),PVV(Pot...
Keywords:Potato  Potato virus A  Potato virus Y  Tobacco mosaic virus  Multiplex PCR  
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