| 水稻基因组文库的构建及YR-DNA的筛选 |
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| 引用本文： | 抗艳红,王罡,季静,张爱香.水稻基因组文库的构建及YR-DNA的筛选[J].河北北方学院学报(自然科学版),2006,22(3):37-39,42. |
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| 作者姓名： | 抗艳红 王罡 季静 张爱香 |
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| 作者单位： | 1. 河北北方学院农业科学系,河北,张家口,075000
2. 天津大学农业与生物工程学院,天津,300072 |
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| 基金项目： | 国家转基因植物研究和产业化专项基金 |
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| 摘 要： | 为了克隆决定染色体形成的特异DNA片段YR-DNA,以λExCell为载体,克隆经限制性内切酶EcoRI消化后的水稻基因组DNA,λ噬菌体体外包装构建了滴度为1.2×106 pfu/ml,重组效率达86%的小型水稻基因组文库.随机选取了50个重组克隆,质粒释放后进行酶切鉴定,插入序列的大小为0.5～7 kb,平均为3 kb.以水稻基因组DNA为探针对基因组DNA文库进行筛选,从10 000个重组子中选出200个杂交信号较强的阳性克隆,质粒释放后点渍杂交进行第2轮筛选,从中选取40个杂交信号较强的重组子,再次进行斑点杂交,选取10个杂交信号最强的重组子.酶切并回收基因组插入片段,标记特异的重组片段,与不同酶切后的水稻基因组DNA进行Southern杂交,其中有两个探针杂交后基因组酶切带上杂交信号呈弥散状,表明重组片段为散在重复序列.
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| 关 键 词： | 水稻基因组库 杂交筛选 YR-DNA |
| 文章编号： | 1673-1492（2006）03-0037-03 |
| 收稿时间： | 03 30 2006 12:00AM |
| 修稿时间： | 2006-03-30 |
The Construction of Rice Genomic Library and Selecting of YR-DNA |
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| KANG Yan-hong,WANG Gang,JI Jing,ZHANG Ai-xiang.The Construction of Rice Genomic Library and Selecting of YR-DNA[J].Journa of Hebei North University:Natural Science Edition,2006,22(3):37-39,42. |
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| Authors: | KANG Yan-hong WANG Gang JI Jing ZHANG Ai-xiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rice genomic library hybridization screening YRDNA |
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