贝氏贝诺孢子虫巢式PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 王文涛,仇建华,段红,常巧呈,路义鑫,王春仁,彭博.贝氏贝诺孢子虫巢式PCR检测方法的建立[J].黑龙江八一农垦大学学报,2016(2):45-49. |
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作者姓名: | 王文涛 仇建华 段红 常巧呈 路义鑫 王春仁 彭博 |
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作者单位: | 1. 黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆163319;东北农业大学动物医学学院;2. 黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆,163319;3. 东北农业大学动物医学学院 |
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基金项目: | 黑龙江省科技攻关项目(GZ13B001),黑龙江省农垦总局科技攻关项目(HNK125B-11-4),大庆市科技局计划项目(SZDFY-2015-21),黑龙江省动物普通疾病防治重点实验室开放课题(120101) |
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摘 要: | 根据Gen Bank上发表的贝氏贝诺孢子虫核糖体内转录间隔区(ITS)序列,在传统PCR方法的基础上设计一对特异性内引物,提取病牛血液中贝氏贝诺孢子虫基因组DNA,建立了贝氏贝诺孢子虫巢氏PCR检测方法并进行临床样品检测。结果表明,建立的巢式PCR检测方法能检测到贝氏贝诺孢子虫DNA的最低浓度为24.3 ag·μL-1,刚地弓形虫、犬新孢子虫、牛巴贝斯虫、环形泰勒虫、边缘无浆体DNA检测均为阴性。196份临床血液样本,检测出3份阳性,阳性率为1.53%。由此可见,研究所建立的巢氏PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,可用于牛贝诺孢子虫病的早期临床诊断。
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关 键 词: | 贝氏贝诺孢子虫 巢氏PCR 检测 核糖体内转录间隔区 |
Establishment of Nested PCR Method for Besnoitia besnoiti |
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Abstract: | |
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