| MAVSΔTM基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达定位 |
| |
| 引用本文： | 杨超玥,李钰昌,郑亮,高鑫誉,曹宏伟,吴志军,张华,高振秋,肖莉杰.MAVSΔTM基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达定位[J].黑龙江八一农垦大学学报,2023(6):95-101. |
| |
| 作者姓名： | 杨超玥 李钰昌 郑亮 高鑫誉 曹宏伟 吴志军 张华 高振秋 肖莉杰 |
| |
| 作者单位： | 1. 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院;2. 黑龙江八一农垦大学动物科技学院;3. 盐城师范学院 |
| |
| 基金项目： | 黑龙江省自然科学基金联合引导项目（LH2019C046）； |
| |
| 摘 要： | 线粒体抗病毒信号蛋白（mitochondria antiviral signaling protein,MAVS）在脊椎动物的抗病毒免疫反应中起着非常重要的作用。为了后续研究MAVS跨膜区氨基酸在病毒侵染宿主细胞时所发挥的作用，通过基因工程方法，构建了MAVS基因C端跨膜结构域缺失突变体（MAVSΔTM）。首先通过PCR技术扩增MAVSΔTM基因片段，通过无缝克隆技术连接到pcDNA3.0-Flag载体上，后经酶切鉴定及测序结果表明MAVSΔTM基因成功克隆到pcDNA3.0-Flag载体上，并将重组质粒定名pcDNA3.0-Flag-MAVSΔTM。将重组质粒pcDNA3.0-Flag-MAVSΔTM转染至人肾上皮细胞（HEK-293T）细胞中，利用蛋白免疫印迹实验和间接免疫荧光技术检测pcDNA3.0-Flag-MAVSΔTM的表达以及定位情况。结果显示，pcDNA3.0-Flag-MAVSΔTM在293T细胞中成功表达，并且均匀分布于细胞中。研究将为进一步研究MAVS蛋白跨膜区氨基酸的功能奠定基础。
|
| 关 键 词： | 真核表达载体 线粒体抗病毒信号蛋白 跨膜区氨基酸 |
|
|
