植物抗病性信号传导调控基因的克隆与表达检测方法的研究 |
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引用本文: | 董宏平,彭建令,余晓江,赵静,王颖,董汉松.植物抗病性信号传导调控基因的克隆与表达检测方法的研究[J].南京农业大学学报,2003,26(4):30-35. |
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作者姓名: | 董宏平 彭建令 余晓江 赵静 王颖 董汉松 |
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作者单位: | 1. 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室,江苏,南京,210095;南京师范大学生命科学学院,江苏,南京,210097 2. 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室,江苏,南京,210095 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(30080011);教育部博士点基金(B200106);江苏省农业高技术项目(BG2001307) |
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摘 要: | 建立了从不同植物中克隆抗病性信号传导调控基因及检测其表达的方法,并优化了相关条件。用RT-PCR和PCR方法从拟南芥、烟草、番茄、中华鳖中克隆了7个信号传导通路中18个调控基因的cDNA和DNA序列,它们分别是:抗病基因Pto介导的蛋白激酶级联中的Pti4、Pti5和Pti6,细胞编程死亡通路中的Hinl和hsr203,水杨酸介导的系统性获得抗病性通路中的NPRI,乙烯信号通路中的ETRl、ERSl、CTRl、EIN2和ERFl,茉莉酸信号通路中的CO/1,核黄素信号通路中的RFBP和LR,脱落酸信号通路中的ABF3、ABF4和ABHI,以及调控不同信号通路的通调基因NDRl。进一步研究了这些基因表达的定量测定方法:用细菌激发子harpinE4处理植物,提取RNA作为cDNA第1链合成的模板,以在真核生物中广泛同源和高度保守的细胞伸长翻译因子基因EFlα为内参,用半定量RT-PCR法测定基因mRNA的积累,可以比较准确地检测不同基因的相对表达水平。
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关 键 词: | 植物 抗病性 信号传导 调控基因 基因克隆 基因表达 检测方法 半定量RT-PCR |
文章编号: | 1000-2030(2003)04-0030-06 |
修稿时间: | 2003年1月17日 |
Studies on methods in cloning and expression quantification of genes that regulate plant disease resistance signal transduction |
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