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激发子诱导的过敏性细胞死亡调控基因的筛选
引用本文:王卫,豆献英,李德青,张正光.激发子诱导的过敏性细胞死亡调控基因的筛选[J].南京农业大学学报,2011,34(3).
作者姓名:王卫  豆献英  李德青  张正光
作者单位:南京农业大学植物保护学院/农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室,江苏,南京,210095
基金项目:国家863计划项目(2008AA10Z410); 国家自然科学基金项目(30871605); 教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-07-0442)
摘    要:采用病毒诱导基因沉默技术从本氏烟(Nicotiana benthamiana)cDNA文库中筛选受3种不同激发子(Nep1、harpin和INF1)诱导的过敏性细胞死亡的调控基因。以农杆菌Gv3101为宿主、利用PVX病毒表达载体构建了含有7 000个单克隆的本氏烟cDNA文库,采用牙签刺伤法和注射接种法,从6 000个克隆中筛选到了34个能使激发子诱发的过敏性细胞死亡表型发生改变的克隆。对上述阳性克隆进行序列测定和分析,发现其中13个与已知的基因具有较高的同源性,其中克隆Nb14-4编码1个特异的ALY蛋白;克隆Nb3-9和Nb4-26分别编码1个苹果酸脱氢酶和果糖二磷酸醛缩酶;Nb4-28编码普通烟草中的14-3-3 d-2蛋白。还有21个克隆在公共数据库中没有同源基因。上述结果表明:利用病毒表达载体建立cDNA文库,并采用病毒诱导基因沉默技术可从烟草全基因组内筛选受不同激发子诱导的过敏性细胞死亡的调控基因,为揭示植物过敏性细胞死亡分子机制提供试验依据。

关 键 词:激发子  过敏性细胞死亡  病毒诱导基因沉默  

Screening of genes regulating hypersensitive cell death induced by elicitors through VIGS in Nicotiana benthamiana
WANG Wei,DOU Xian-ying,LI De-qing,ZHANG Zheng-guang.Screening of genes regulating hypersensitive cell death induced by elicitors through VIGS in Nicotiana benthamiana[J].Journal of Nanjing Agricultural University,2011,34(3).
Authors:WANG Wei  DOU Xian-ying  LI De-qing  ZHANG Zheng-guang
Institution:WANG Wei,DOU Xian-ying,LI De-qing,ZHANG Zheng-guang(College of Plant Protection/Key Laboratory of Monitoring and Management of Crop Diseases and Pest Insects,Ministry of Agriculture,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China)
Abstract:Virus-induced gene silencing(VIGS)was used to isolate cDNAs from tobacco(Nicotiana benthamiana).Here,we used VIGS to screen genes regulating hypersensitive cell death(HCD)triggered by three various elicitors including Nep1,harpin and INF1.The cDNA library was constructed into a binary potato virus X(PVX)-based expression vector and Agrobacterium tumefeciens(Gv3101).6 000 clones were individually toothpick-inoculated or injection-inoculated into leaves of N.benthamiana to induce targeted gene silencing.These...
Keywords:elicitor  hypersensitive cell death  virus-induced gene silencing  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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