| 生长抑素(SS)基因在pET-32表达系统中的高效表达 |
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| 引用本文： | 刘永庆,刘文波,潘杰彦,杜念兴,陈溥言,赵国屏.生长抑素(SS)基因在pET-32表达系统中的高效表达[J].南京农业大学学报,2003,26(1):61-65. |
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| 作者姓名： | 刘永庆 刘文波 潘杰彦 杜念兴 陈溥言 赵国屏 |
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| 作者单位： | 1. 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京210095
2. 中国科学院上海生物工程研究中心,上海200233 |
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| 基金项目： | 国家 8 63项目中试项目 |
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| 摘 要： | 分别将SS基因克隆至pET 32a和pET 32c表达系统中 ,得到重组质粒SS N/X和SS N/S。实验结果表明 ,SS N/X Thioredoxin (硫氧还原蛋白 )和SS N/S Thioredoxin融合蛋白在IPTG (异丙基硫代 β D半乳糖苷 )诱导 3h后(37℃ )表达产量最高 ,约占菌体总蛋白的 30 %左右。 0 0 5～ 1mmol·L-1IPTG对SS融合蛋白表达产量的影响并不太大 ,0 0 5mmol·L-1IPTG即可达到有效的诱导效果 ,但单位体积内的表达产量以 0 5mmol·L-1时为最高。乳糖诱导 4h(37℃ )的效果明显低于IPTG ,但当培养时间延长至 8h时 ,2 0mg·mL-1的乳糖可达到与IPTG同样的诱导效果 ,10和 5mg·mL-1的乳糖也可接近IPTG的诱导效果。SS N/X融合蛋白在 2 6℃表达时 ,主要以可溶性形式存在 ,占75 8% ,包涵体仅占 2 4 2 % ;而SS N/S融合蛋白则主要以包涵体形式存在 ,占 6 0 2 % ,可溶性蛋白仅占 39 8%。SS可溶性融合蛋白具有良好的SS抗原性。
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| 关 键 词： | 生长抑素 基因 pET－32表达系统 高效表达 异丙基硫代－β－D－半乳糖苷 IPTG 乳糖 融合蛋白 动物生长 |
| 文章编号： | 1000-2030(2003)01-0061-05 |
| 修稿时间： | 2002年8月28日 |
Cloning and expression of somatostation(SS) gene in E.coli pET-32 expression system |
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| LIU Yong qing ,LIU Wen bo ,PAN Jie yan ,DU Nian xing ,CHEN Pu yan ,ZHAO Guo ping.Cloning and expression of somatostation(SS) gene in E.coli pET-32 expression system[J].Journal of Nanjing Agricultural University,2003,26(1):61-65. |
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| Authors: | LIU Yong qing LIU Wen bo PAN Jie yan DU Nian xing CHEN Pu yan ZHAO Guo ping |
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| Institution: | LIU Yong qing 1,LIU Wen bo 1,PAN Jie yan 1,DU Nian xing 1,CHEN Pu yan 1*,ZHAO Guo ping 2 |
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