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利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究
引用本文:朱云,樊娜娜,于耀华,张柏顺,杨煜,晁祥建,郭宝太,金黎平,郭晓,李广存.利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究[J].华北农学报,2012(4):18-22.
作者姓名:朱云  樊娜娜  于耀华  张柏顺  杨煜  晁祥建  郭宝太  金黎平  郭晓  李广存
作者单位:青岛农业大学生命科学院;山东省农业科学院蔬菜研究所,国家蔬菜改良中心山东分中心,山东省设施蔬菜分子生物学重点实验室;中国农业科学院蔬菜花卉研究所
基金项目:现代农业产业技术体系专项资金资助(CARS-10-ES10);国家科技支撑项目(2012BAD02B05);山东省自然科学基金项目(Y2007D24;ZR2010CQ025);人力资源和社会保障部留学回国人员科技活动项目择优资助项目
摘    要:植物类受体蛋白激酶(Receptor-like protein kinase,RLK)是蛋白激酶的一个亚家族,参与植物的信号转导,在植物生长发育、抗病等过程中起重要作用。在前期研究中自二倍体马铃薯高抗青枯病基因型ED13中获得了类受体蛋白激酶基因StRLK。利用StRLK基因的特异区段,以pUCCRNAi为中间克隆载体、pCHF1为植物表达载体,构建了该基因的RNA干扰载体pCHF1-StRLK。进一步以ED13的茎段为外植体,利用农杆菌介导法将pCHF1-StRLK导入ED13中,获得了5株再生植株。用CaMV35S启动子特异引物对5株再生植株进行PCR扩增,均得到大小约500 bp的特异性条带,初步证明pCHF1-StRLK成功转入ED13。以ED13为对照,利用StRLK基因的特异引物对这5株再生植株进行半定量RT-PCR分析,结果表明,该基因的表达在5个转基因植株中均受到了不同程度的抑制,说明导入的pCHF1-StRLK发挥了干扰活性,且干扰效果与基因的插入位点有关,为进一步研究StRLK基因的功能提供依据。

关 键 词:二倍体马铃薯  StRLK基因  遗传转化  RNA干扰

RNA Interference Analysis of Receptor-like Kinase Gene (StRLK) in Potato
ZHU Yun,FAN Na-na,YU Yao-hua,ZHANG Bai-shun,YANG Yu,CHAO Xiang-jian,GUO Bao-tai,JIN Li-ping,GUO Xiao,LI Guang-cun.RNA Interference Analysis of Receptor-like Kinase Gene (StRLK) in Potato[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2012(4):18-22.
Authors:ZHU Yun  FAN Na-na  YU Yao-hua  ZHANG Bai-shun  YANG Yu  CHAO Xiang-jian  GUO Bao-tai  JIN Li-ping  GUO Xiao  LI Guang-cun
Institution:1,2(1.Life Science College of Qingdao Agricultural University,Qingdao 266109,China;2.Vegetable Research Institute, Shandong Academy of Agricultural Sciences,National Improvement Center for Vegetable,Shandong Branch, Molecular Biology Key Laboratory of Shandong Facility Vegetable,Jinan 250100,China;3.Institute of Vegetables and Flowers,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081,China)
Abstract:
Keywords:
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