| O型FMDV P1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒的构建及其在BHK-21细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 吴国华,张强,颜新敏,侯俊玲,赵志荀,崔力凡,李健,朱海霞,朱彩珠.O型FMDV P1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒的构建及其在BHK-21细胞中的表达[J].华北农学报,2010,25(5). |
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| 作者姓名： | 吴国华 张强 颜新敏 侯俊玲 赵志荀 崔力凡 李健 朱海霞 朱彩珠 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑项目，甘肃省重大科技项目 |
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| 摘 要： | 为了构建O型FMDV P1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒并在BHK-21细胞中进行表达,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)从阳性质粒pGEM-P12A克隆到P1-2A基因,将扩增产物纯化、双酶切后连接到pBudCE-IFN载体,构建重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A.重组表达质粒鉴定后,在脂质体介导下转染BHK-21细胞,用RT-PCR和直接免疫荧光试验分别检测P1-2A 和IFN-γ在BHK-21细胞中的表达.RT-PCR检测显示,重组表达质粒转染细胞后P1-2A 和IFN-γ基因成功转录出mRNA;免疫荧光试验表明目的基因在BHK-21细胞中获得了表达.结果证明,本研究成功构建了重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A并在体外进行了表达,这为研制抗FMDV DNA疫苗和IFN-γ的佐剂作用奠定了坚实基础.
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| 关 键 词： | FMDV P1-2A基因 IFN-γ基因 共表达 |
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