| 草果AtNCED基因克隆、表达和植物表达载体构建 |
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| 引用本文： | 潘春柳,姚绍嫦,黄燕芬,唐美琼,朱艳霞,董青松,余丽莹.草果AtNCED基因克隆、表达和植物表达载体构建[J].分子植物育种,2020(5):1520-1528. |
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| 作者姓名： | 潘春柳 姚绍嫦 黄燕芬 唐美琼 朱艳霞 董青松 余丽莹 |
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| 作者单位： | 广西壮族自治区药用植物园;广西中医药大学 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金项目(2016GXNSFBA380008);广西科技基地和人才专项(桂科AD17129020)共同资助。 |
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| 摘 要： | 9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase, NCED)是ABA生物合成的限速酶。诸多研究表明NCED基因表达量的变化与ABA含量显著相关,在种子休眠过程中发挥重要作用。为探究草果AtNCED基因的序列特征和功能,本研究以草果(Amomum tsaoko Crevost et Lemarie)种子转录组为基础,采用RT-PCR技术克隆了一个AtNCED基因。该基因全长2 372 bp,包含一个1 830 bp的开放阅读框(open reading frame, ORF),编码610个氨基酸。生物信息学分析显示,AtNCED基因编码的蛋白在N-末端包含典型的叶绿体转运肽序列,在催化结构域含有4个高度保守的组氨酸残基。AtNCED蛋白与芭蕉科马来西亚蕉同源性较高,与其他单子叶植物处在同一进化分支。实时荧光定量PCR分析结果表明,AtNCED基因表达量随着层积时间的增加逐渐下降,该基因可能正向调控种子休眠,在草果种子休眠诱导与维持中发挥重要作用。进一步地,利用同源重组方法,成功构建了pBI121-AtNCED过表达载体,并转化至农杆菌EHA105。该研究结果为弄清ABA激素信号在种子休眠中的调控作用提供了帮助。
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| 关 键 词： | 草果 AtNCED基因 克隆 表达载体构建 |
Cloning,Expression and Plant Expression Vector Construction of AtNCED Gene from Amomum tsaoko |
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| Pan Chunliu,Yao Shaochang,Huang Yanfen,Tang Meiqiong,Zhu Yanxia,Dong Qingsong,Yu Liying.Cloning,Expression and Plant Expression Vector Construction of AtNCED Gene from Amomum tsaoko[J].Molecular Plant Breeding,2020(5):1520-1528. |
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| Authors: | Pan Chunliu Yao Shaochang Huang Yanfen Tang Meiqiong Zhu Yanxia Dong Qingsong Yu Liying |
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| Institution: | (Guangxi Key Laboratory of Medicinal Resources Conservation and Genetic Improvement,Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plant,Nanning,530023;Institute of Marine Drugs,Guangxi University of Chinese Medicine,Nanning,530001) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Amomum tsaoko AtNCED gene Cloning Constructing plant expression vector |
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