| 割手密线粒体DNA的简易快速提取方法 |
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| 引用本文： | 田春艳,王先宏,李富生,何丽莲,娄红波,杨清辉,肖关丽,唐荣平.割手密线粒体DNA的简易快速提取方法[J].分子植物育种,2015(5). |
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| 作者姓名： | 田春艳 王先宏 李富生 何丽莲 娄红波 杨清辉 肖关丽 唐荣平 |
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| 作者单位： | 1. 云南农业大学甘蔗研究所，昆明，650201
2. 云南临沧高等师范专科学校数理系，临沧，677000 |
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| 基金项目： | 云南省应用基础研究面上项目，云南农业大学博士科研基金项目，云南省现代农业甘蔗产业技术体系建设项目，云南省重点新产品开发计划项目，云南农业大学高原山地作物可持续生产系统研究省创新团队 |
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| 摘 要： | 高效快速地分离提取高质量的线粒体DNA(mtDNA)是研究植物线粒体基因及其起源进化的重要前提。为获得高质量的mtDNA进行割手密资源的线粒体基因序列扩增及测序分析,本研究以割手密黄化苗为材料,通过简单差速离心分离得到线粒体,经DNaseⅠ消化处理,去除核DNA杂质得到较纯的线粒体,然后经过5%SDS和蛋白酶K充分裂解线粒体,利用饱和的苯酚/氯仿(1:1)和氯仿两次抽提除去蛋白质,并经过RNase A的消化处理除去RNA,无水乙醇沉淀等一系列操作得到mtDNA。所提取的mtDNA样品经紫外吸收光度测定,琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增分析其浓度和纯度,结果表明利用该方法提取的mtDNA纯度高,完全能满足后续PCR分析及分子克隆测序的要求。该方法不仅DNA提取纯度高,操作简单、快速经济,可为今后开展甘蔗及其各野生种的研究提供技术支持。
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| 关 键 词： | 甘蔗 割手密 线粒体DNA 提取方法 |
A Simple and Rapid Extraction Method for Mitochondrial DNA of Saccharum spontaneum |
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| Tian Chunyan,Wang Xianhong,Li Fusheng,He Lilian,Lou Hongbo,Yang Qinghui,Xiao Guanli,Tang Rongping.A Simple and Rapid Extraction Method for Mitochondrial DNA of Saccharum spontaneum[J].Molecular Plant Breeding,2015(5). |
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| Authors: | Tian Chunyan Wang Xianhong Li Fusheng He Lilian Lou Hongbo Yang Qinghui Xiao Guanli Tang Rongping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sugarcane Saccharum spontaneum Mitochondrial DNA Extraction method |
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