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pBI121载体酶切位点添加及拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因表达载体的构建
引用本文:张俊莲,王蒂,张金文,陈正华.pBI121载体酶切位点添加及拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因表达载体的构建[J].分子植物育种,2006,4(6):811-818.
作者姓名:张俊莲  王蒂  张金文  陈正华
作者单位:1. 甘肃农业大学农学院,兰州,730070;甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室,兰州,730070
2. 甘肃亚盛集团博士后科研工作站北京分站,北京,100101
基金项目:甘肃省科技攻关项目;甘肃省农业厅生物技术项目
摘    要:对pBI121载体GUS基因后的终止子序列(Sac Ⅰ-EcoR Ⅰ)通过PCR扩增法进行了酶切位点的添加,即在SacⅠ后添加了XhoⅠ、在EcoRⅠ前添加了KpnⅠ。序列分析发现,两个酶切位点的添加是成功的,但扩增的终止子序列与原序列的同源性间有差异,即有4个碱基发生了变异,特别是第17个碱基位点出现了缺失。利用绿色荧光蛋白(GFP)对添加酶切位点载体进行了终止子活性的检测,结果发现,它与携带GFP的pBI121载体一样,GFP基因能正常表达,说明pBI121载体终止子序列酶切位点的添加是成功的。利用改造后的载体(pBI121-GZ)构建了CaMV35S启动子驱动AtNHX1基因的植物表达载体。

关 键 词:终止子  限制性酶  绿色荧光蛋白  植物表达载体

Modification of pBI121 Vector and Expression Vector Construction Na+/H+ Antiporter of Arabidopsis thaliana
Zhang Junlian,Wang Di,Zhang Jinwen,Chen Zhenghua.Modification of pBI121 Vector and Expression Vector Construction Na+/H+ Antiporter of Arabidopsis thaliana[J].Molecular Plant Breeding,2006,4(6):811-818.
Authors:Zhang Junlian  Wang Di  Zhang Jinwen  Chen Zhenghua
Abstract:
Keywords:pBI121
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