| 靶向马铃薯StProDH1基因的CRISPR/Cas9 sgRNA表达载体构建 |
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| 引用本文： | 李世贵,杨江伟,朱熙,王树林,张宁,司怀军.靶向马铃薯StProDH1基因的CRISPR/Cas9 sgRNA表达载体构建[J].分子植物育种,2019,17(3):841-845. |
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| 作者姓名： | 李世贵 杨江伟 朱熙 王树林 张宁 司怀军 |
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| 作者单位： | 甘肃农业大学生命科学技术学院,兰州,730070;甘肃农业大学生命科学技术学院,兰州,730070;甘肃农业大学,甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点试验室培育基地,甘肃省作物遗传改良与种质创新重点试验室,兰州,730070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;甘肃农业大学伏羲人才计划项目 |
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| 摘 要： | CRISPR/Cas9基因编辑系统已成为许多作物基因功能研究和品种改良的重要工具。脯氨酸(Pro)在植物响应干旱胁迫方面起着重要作用,脯氨酸脱氢酶ProDH是脯氨酸分解途径中的限速酶。为了研究StProDH1在马铃薯脯氨酸代谢中的作用,本研究以StProDH1为靶基因,构建了表达马铃薯脯氨酸脱氢酶g RNA的CRISPR/Cas9基因敲除系统,在StProDH1基因5'端第一个外显子上为靶标区域选择设计sgRNA,以p P1C.4为模板,克隆得到sgRNA克隆框,将得到的sgRNA克隆框通过同源重组技术连接到pP1C.4载体中,获得pP1C.4-Cas9-ProDH1-g RNA载体。通过设计引物特异性扩增以及测序进一步确定sgRNA准确地连入载体,这对马铃薯中脯氨酸累积及其培育抗旱马铃薯新品种具有重要意义。
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| 关 键 词： | CRISPR/Cas9基因编辑系统 马铃薯 ProDH1 载体构建 |
Expression Vector Construction for sgRNA Targeting Potato StProDH1 Gene in CRISPR/Cas9 System |
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| Li Shigui,Yang Jiangwei,Zhu Xi,Wang Shuling,Zhang Ning,Si Huaijun.Expression Vector Construction for sgRNA Targeting Potato StProDH1 Gene in CRISPR/Cas9 System[J].Molecular Plant Breeding,2019,17(3):841-845. |
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| Authors: | Li Shigui Yang Jiangwei Zhu Xi Wang Shuling Zhang Ning Si Huaijun |
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| Institution: | (College of Life Science and Technology,Gansu Agricultural University,Lanzhou,730070;Gansu Provincial Key Laboratory of Aridland Crop Sci- ence,Gansu Key Laboratory of Crop Improvement &Germplasm Enhancement,Gansu Agricultural University,Lanzhou,730070) |
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| Abstract: | Li Shigui;Yang Jiangwei;Zhu Xi;Wang Shuling;Zhang Ning;Si Huaijun(College of Life Science and Technology,Gansu Agricultural University,Lanzhou,730070;Gansu Provincial Key Laboratory of Aridland Crop Sci- ence,Gansu Key Laboratory of Crop Improvement &Germplasm Enhancement,Gansu Agricultural University,Lanzhou,730070) |
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| Keywords: | CRISPR/Cas9 gene editing system Potato ProDH1 Vector construction |
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