濒危藏药桃儿七cpSSR-PCR引物开发与反应体系优化 |
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引用本文: | 张盾,任梦云,张银东,关潇.濒危藏药桃儿七cpSSR-PCR引物开发与反应体系优化[J].分子植物育种,2018(9). |
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作者姓名: | 张盾 任梦云 张银东 关潇 |
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作者单位: | 中国环境科学研究院;海南大学热带农林学院 |
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摘 要: | 利用桃儿七叶绿体全基因组开发cpSSR引物,使用正交设计试验,对桃儿七cpSSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA,Mg~(2+),Taq DNA酶,dNTPs及ISSR引物)进行筛选优化来研究桃儿七遗传多样性。选取甘肃碌曲县则岔石林桃儿七居群样本及13个不同桃儿七居群验证该反应体系。正交试验表明:各因素显著性为Mg~(2+)引物Taw酶DNA浓度dNTPs,桃儿七cuss-PCR反应的最佳体系为(25μL):DNA20 ng/μL,Mg~(2+)1.5 mmol/L,dNTPs 2.0 mmol/L,Taq DNA酶0.5 U,引物1.0μmol/L,2.5μL 10×Buffer。该体系具有很高的稳定性和重复性,并为野生桃儿七遗传多样性及保护策略研究提供了技术支持。
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