| 利用正交设计优化水曲柳ISSR-PCR反应体系 |
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| 引用本文： | 谢运海,夏德安,姜静,林萍.利用正交设计优化水曲柳ISSR-PCR反应体系[J].分子植物育种,2005,3(3):445-450. |
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| 作者姓名： | 谢运海 夏德安 姜静 林萍 |
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| 作者单位： | 1. 东北林业大学林学院,哈尔滨,150040
2. 黑龙江省林业科学院,哈尔滨,150040 |
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| 摘 要： | 利用正交设计L16(4^5）对水曲柳ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶，Mg^2 ，模板DNA，dNTP，引物)在4个水平上进行优化试验，PCR结果用统计软件MINITAB分析：①各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响，其中Taq酶量影响最大；②筛选出各反应因素的最佳水平，建立水曲柳ISSR-PCR反应的最佳体系(20μl)为：Taq酶1．0U，Mg^2 2．0mmol/L，模板DNA50-200ng，dNTP0．15mmol/L，引物0．31μmol／L。最后，对水曲柳ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火，得到最佳退火温度为58．3℃。这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术，研究水曲柳的地理变异提供一个标准化程序。
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| 关 键 词： | 正交设计 水曲柳 |
Optimization for ISSR-PCR System of Fraxinus mandshurica Rupr. Using Orthogonal Design |
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| Xie Yunhai,Xia De'an,Jiang Jing,Lin ping.Optimization for ISSR-PCR System of Fraxinus mandshurica Rupr. Using Orthogonal Design[J].Molecular Plant Breeding,2005,3(3):445-450. |
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| Authors: | Xie Yunhai Xia De'an Jiang Jing Lin ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ISSR-PCR |
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