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刺槐EST-SSR标记PCR反应体系的优化
引用本文:赵克奇,董黎,孙宇涵,孙文婷,袁存权,王玉玲,荀守华,张江涛,李云.刺槐EST-SSR标记PCR反应体系的优化[J].中国农学通报,2014,30(22):45-52.
作者姓名:赵克奇  董黎  孙宇涵  孙文婷  袁存权  王玉玲  荀守华  张江涛  李云
作者单位:1. 北京林业大学2. 3. 林木育种国家工程实验室/北京林业大学生物科学与技术学院4. 北京风沙源育苗中心5. 山东省林业科学研究院6. 河南省林业科学研究院
基金项目:国家自然科学基金项目;林业公益性行业科研专项;国家科技支撑项目
摘    要:为建立一套适用于刺槐EST-SSR标记的 PCR反应体系,采用L16(45)正交试验设计结合单因素试验,对刺槐EST-SSR PCR反应体系中的5个主要因素:引物、DNA模板、dNTPs、Mg2+和Taq DNA聚合酶进行优化试验。结果表明:在20 μL反应体系中,各反应因素的最佳水平为0.5 μmol/L引物、30 ng模板DNA、0.15 mmol/L dNTP、0.5 mmol/L Mg2 +、1.0 U Taq DNA聚合酶。利用随机挑选的3个刺槐优良无性系品种和7对EST-SSR引物对优化体系进行验证,结果均能获得稳定、清晰的条带,证明该体系稳定可靠。此优化体系的建立为刺槐EST-SSR标记的开发以及利用EST-SSR标记深入研究和利用中国刺槐种质资源奠定基础。

关 键 词:PCR反应体系
收稿时间:2014/2/14 0:00:00
修稿时间:3/8/2014 12:00:00 AM

The Optimization of EST-SSR PCR Reaction System for Robinia pseudoacacia L.
Abstract:
Keywords:PCR reaction system
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