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蚜虫基因RNAi载体的构建及其在转基因烟草中dsRNA的表达分析
引用本文:高朝宝,李晓明,彭明,崔百明.蚜虫基因RNAi载体的构建及其在转基因烟草中dsRNA的表达分析[J].中国农学通报,2011,27(15):229-232.
作者姓名:高朝宝  李晓明  彭明  崔百明
作者单位:1. 新疆石河子大学生农业重点实验室,新疆石河子,832000
2. 山东福田药业有限公司,山东德州,251200
3. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海口,571101
摘    要:RNAi机制可以通过dsRNA诱导同源mRNA的降解,从而导致该基因转录后沉默。RNA干扰作用从发现以来就具有了利用转录后基因沉默(PTGS)来进行抗虫的一种潜在可能性。针对dsRNA的这种作用,研究中提取蚜虫RNA,克隆出蚜虫Cathepsin B基因的干扰片段并构建出RNAi载体,转入本氏烟草中,在转基因烟草体内表达dsRNA。成功构建RNAi载体后,通过农杆菌转化和叶盘法将RNAi载体导入烟草中并采用组织培养方法培养出转基因烟草,通过PCR鉴定显示15株生根的转基因烟草中14株显示阳性。提取转基因烟草的RNA进行RT-PCR和Northern表达分析显示转基因烟草植株中dsRNA表达的存在。实验结果说明了在转基因植物体内表达RNAi载体可以产生dsRNA,从而在蚜虫进食植物时达到利用dsRNA抗蚜虫的作用。

关 键 词:烟叶烘烤  烟叶烘烤  
收稿时间:2011/2/15 0:00:00
修稿时间:2011/3/11 0:00:00

The Construction of RNAi Vector of Aphis gossypii Gene and the Analysis of the Expression of DsRNA in Transgenic Tobacco Inserted with RNAi Vector
Gao Chaobao,Li Xiaoming,Peng Ming,Cui Baiming.The Construction of RNAi Vector of Aphis gossypii Gene and the Analysis of the Expression of DsRNA in Transgenic Tobacco Inserted with RNAi Vector[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2011,27(15):229-232.
Authors:Gao Chaobao  Li Xiaoming  Peng Ming  Cui Baiming
Institution:Gao Chaobao 1,Li Xiaoming 2,Peng Ming 3,Cui Baiming 1 (1 Key Laboratory of Agriculture Biotechnology of Shihezi University,Shihezi Xinjiang 832000,2 Shandong Futaste Pharmaceutical Co.Ltd.,Dezhou Shandong 251200,3 The Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Haikou 571101)
Abstract:
Keywords:transgene  RNA interfering  Northern blot  dsRNA  Cathepsin B gene  
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