高粱幼叶细胞悬浮系的建立 |
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引用本文: | 郝艳芳,王良群,刘勇,张微,杨伟,白鸿雁,武擘.高粱幼叶细胞悬浮系的建立[J].作物杂志,2018(1). |
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作者姓名: | 郝艳芳 王良群 刘勇 张微 杨伟 白鸿雁 武擘 |
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作者单位: | 山西省农业科学院高粱研究所;高粱遗传与种质创新山西省重点实验室; |
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摘 要: | 以高粱无菌苗幼叶为试验材料,对颗粒状胚性愈伤组织的获得、细胞悬浮系的建立及影响悬浮细胞生长的主要因素进行了研究。结果表明:幼叶在MS(Murashige and Skoog)+2mg/L 2,4-D培养基上诱导出的愈伤组织,经2~3次继代筛选后获得了浅黄色、颗粒状胚性愈伤组织;胚性愈伤组织接种于液体培养基中,于25±1℃、黑暗条件下,经45~60d的悬浮震荡培养建立了高质量的细胞悬浮系,细胞生长曲线呈"S"型,细胞密度可达6.45×10~5~5.08×10~6个/mL以上,活细胞率可达72.76%,近圆细胞率可达87.50%;培养基的基本成分、激素种类和水平对悬浮细胞生长状态有很大的影响,相比1/2MS培养基,MS培养基为适宜的培养基,2,4-D对保持细胞系的稳定增殖至关重要,适宜的浓度为1mg/L;培养液中加入0.5mg/L KT或6-BA会造成悬浮液褐化,影响悬浮细胞的生长;最适宜的细胞悬浮培养基为L2培养基(MS+1mg/L 2,4-D,30g/L蔗糖,pH5.8),震荡培养转速为110~120r/min,继代周期为7d,新旧培养基的接种比例为2∶1。
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关 键 词: | 高粱 细胞悬浮系 活细胞率 近圆细胞率 细胞密度 |
Establishment of Sorghum Cell Suspensions with Young Leaves |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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