| 辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)实时荧光定量检测方法的研究 |
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| 引用本文： | 王淑芳,马桂珍,暴增海,李世东,陈月,钱媛媛,尹璐.辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)实时荧光定量检测方法的研究[J].作物杂志,2012(5):30-35. |
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| 作者姓名： | 王淑芳 马桂珍 暴增海 李世东 陈月 钱媛媛 尹璐 |
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| 作者单位： | 江苏省海洋生物技术重点建设实验室;淮海工学院海洋学院;中国农业科学研究院植物保护研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30971954);国家大宗蔬菜产业技术体系建设项目(CARS-25-B-2);连云港市科技局工业攻关项目(CG1005);江苏省高校自然科学研究重大项目(12KJA210001) |
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| 摘 要： | 为建立快速准确的检测土壤中辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici Leonian)的实时荧光定量体系的方法,根据辣椒疫霉菌保守的ITS序列设计的特异性荧光实时定量PCR的引物,通过对保守序列构建克隆文库,筛选阳性克隆子,制备用于实时荧光定量体系的标准品,从而构建优良的标准曲线。利用构建的标准曲线和优化的实时荧光定量体系对人工接种含梯度浓度的辣椒疫霉菌的土壤样品进行实时荧光定量PCR检测。辣椒疫霉菌荧光实时定量PCR检测体系的标准曲线的相关系数为R2=0.980,斜率为-3.295,扩增效率为101.1%,线性方程为Y=-3.295X+44.484,标准品的检测下限为1.000×102拷贝,带菌土壤的检测下限为1.236×103拷贝,约为4.887pg基因组DNA。经过土壤样品试验,得出标准曲线相关系数为0.9845,表明所建立的辣椒疫霉菌实时荧光定量PCR检测方法合理有效。
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| 关 键 词： | 辣椒疫霉菌 快速检测 实时荧光定量PCR |
Studies on the Real-Time Quantitative PCR Method of Phytophthora capsici |
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| Wang Shufang,Ma Guizhen,Bao Zenghai,Li Shidong,Chen Yue,Qian Yuanyuan,Yin Lu.Studies on the Real-Time Quantitative PCR Method of Phytophthora capsici[J].Crops,2012(5):30-35. |
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| Authors: | Wang Shufang Ma Guizhen Bao Zenghai Li Shidong Chen Yue Qian Yuanyuan Yin Lu |
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| Institution: | 1Key Laboratory of Marine Biotechnology in Jiangsu Province,Huaihai Institute of Technology, Lianyungang 222005,Jiangsu;2School of Marine Sciences,Huaihai Institute of Technology, Lianyungang 222005,Jiangsu;3Institutes of Plant Protection,CAAS,Beijing 100081,China) |
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