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白菜型冬油菜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因的克隆、表达及其活性分析
引用本文:曾秀存,孙万仓,方彦,刘自刚,董云,孙佳,武军艳,张鹏飞,史鹏辉,孔德晶,张腾国,何丽,赵彩霞.白菜型冬油菜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因的克隆、表达及其活性分析[J].作物学报,2013,39(8):1400-1408.
作者姓名:曾秀存  孙万仓  方彦  刘自刚  董云  孙佳  武军艳  张鹏飞  史鹏辉  孔德晶  张腾国  何丽  赵彩霞
作者单位:1甘肃农业大学农学院, 甘肃兰州 730070; 2河西学院农业与生物技术学院, 甘肃张掖734000; 3甘肃省农业科学院作物研究所, 甘肃兰州 730070;
4 Department of Plant Sciences, University of Saskatchewan, Saskatoon, Saskatchewan, Canada. S7N5A8; 5西北师范大学生命科学学院, 甘肃兰州 730070
基金项目:本研究由国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA10A104), 国家公益性行业(农业)科研专项经费项目(200903002-04)和国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-13)资助。
摘    要:抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶。本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物, 采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA, 获得APX基因开放阅读框, 长度为753 bp, 编码250个氨基酸残基, 推导的氨基酸序列具有APX蛋白的典型特征。生物信息学分析显示, 与已报道的大白菜的APX氨基酸序列同源性达到99%, 该酶蛋白具有高度的进化保守性, 其保守序列属于植物的POD超家族, APX相对分子质量和理论等电点依次为27.7 kD和5.58;APX基因无信号肽, 是一个亲水性蛋白, 可推测其定位于细胞质中;二级结构预测表明陇油7号的APX是由不规则卷曲和α-螺旋组成的稳定蛋白。实时荧光定量PCR和酶活性分析显示, 该基因表达和酶活性受低温胁迫诱导, 表明该基因在白菜型冬油菜陇油7号适应低温胁迫过程中发挥重要作用。

关 键 词:白菜型油菜  低温  APX基因克隆  表达分析  APX活性
收稿时间:2012-12-23

Cloning,Expression, and Activity Analysis of Ascorbate Peroxidase (APX) Gene from Winter Turnip Rape (Brassica campestris L.)
ZENG Xiu-Cun,SUN Wan-Cang,FANG Yan,LIU Zi-Gang,DONG Yun,SUN Jia,WU Jun-Yan,ZHANG Peng-Fei,SHI Peng-Hui,KONG De-Jing,ZHANG Teng-Guo,HE Li,ZHAO Cai-Xia.Cloning,Expression, and Activity Analysis of Ascorbate Peroxidase (APX) Gene from Winter Turnip Rape (Brassica campestris L.)[J].Acta Agronomica Sinica,2013,39(8):1400-1408.
Authors:ZENG Xiu-Cun  SUN Wan-Cang  FANG Yan  LIU Zi-Gang  DONG Yun  SUN Jia  WU Jun-Yan  ZHANG Peng-Fei  SHI Peng-Hui  KONG De-Jing  ZHANG Teng-Guo  HE Li  ZHAO Cai-Xia
Institution:1.Agricultural College, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China;2.College of Agronomy and Biotechnology, Hexi University, Zhangye 734000, China;3.Crop Research Institute, Gansu Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730070 China;4.Department of Plant Sciences, University of Saskatchewan, Saskatoon, Saskatchewan, Canada. S7N5A8;5.College of Life Science, Northwest Normal University, Lanzhou 730070, China
Abstract:
Keywords:Winter rape (Brassica compestris L  )  Lower temperature  APX gene cloning  Expression analysis  Activity of APX
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