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TRV病毒介导的基因沉默体系在棉花中的建立及应用
引用本文:王心宇,吕坤,蔡彩平,徐君,郭旺珍.TRV病毒介导的基因沉默体系在棉花中的建立及应用[J].作物学报,2014,40(8):1356-1363.
作者姓名:王心宇  吕坤  蔡彩平  徐君  郭旺珍
作者单位:1 南京农业大学生命科学学院, 江苏南京210095;2 南京农业大学农学院 / 作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京210095
基金项目:本研究由国家自然科学基金项目(31171590)和江苏省自然科学基金项目(BK2010065)资助。
摘    要:以陆地棉CLA1基因为标记基因,利用烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)载体建立基于病毒介导的棉花基因沉默体系(virus-induced gene silencing,VIGS)。病毒RNA2的RT-PCR分析证明,棉花子叶接种TRV病毒后,该病毒可高效扩散到受体的根、茎、叶等器官。利用TRV-VIGS体系同时诱导34份不同来源棉花材料CLA1基因沉默,尽管不同材料间的抑制程度有差异,但均可有效抑制CLA1基因的表达,说明该体系在棉花研究中的广谱利用性。GhMAPKKK基因受黄萎病菌诱导表达,接种后96 h表达量达到高峰。利用TRV-VIGS体系,成功抑制了棉花GhMAPKKK基因的表达,与对照株相比,抑制后的棉花植株接种黄萎病菌后更易感病,说明GhMAPKKK参与了棉花对黄萎病菌的抗性反应。具有广谱性、灵敏性和高通量等特点的棉花TRV-VIGS体系建立将加速棉花功能基因组研究进程。

关 键 词:棉花  TRV-VIGS  GhCLA1  GhMAPKKK  黄萎病
收稿时间:2014-01-10

Establishment and Application of TRV-mediated Virus-Induced Gene Silencing in Cotton
WANG Xin-Yu,Lü Kun,CAI Cai-Ping,XU Jun,GUO Wang-Zhen.Establishment and Application of TRV-mediated Virus-Induced Gene Silencing in Cotton[J].Acta Agronomica Sinica,2014,40(8):1356-1363.
Authors:WANG Xin-Yu  Lü Kun  CAI Cai-Ping  XU Jun  GUO Wang-Zhen
Institution:1.College of Life Sciences, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China;2.State Key Laboratory of Crop Genetics & Germplasm Enhancement / College of Agriculture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China
Abstract:
Keywords:Cotton  TRV-VIGS  GhCLA1  GhMAPKKK  Verticillium wilt
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