| 甘蓝型油菜BnMAPK1的原核表达、亚细胞定位及酵母双杂交文库筛选 |
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| 基金项目： | National Natural Science Foundation of China(31872876);National Natural Science Foundation of China(31271756);Project of Intellectual Base for Discipline Innovation in Colleges and Universities(B12006) |
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| 摘 要： | 植物的丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-ActivatedProteinKinases,MAPKs)级联是生长进程中多种信号跨膜传递的共同通路,它可以将外源刺激转入细胞内并引发细胞应答。目前C族MAPKs在甘蓝型油菜中的研究报道还很有限。本研究通过1个甘蓝型油菜的C族BnMAPK1基因的生物学进程聚类分析发现, BnMAPK1可能参与蛋白磷酸化、生长素介导的信号途径、逆境应答、细胞周期及转录等过程。BnMAPK1具有369个氨基酸残基,其相对分子质量约为42.5 kD,其可溶性蛋白可在原核系统中被诱导表达。BnMAPK1的亚细胞定位结果显示, BnMAPK1主要在细胞核内表达。Bait质粒pGBKT7-BnMAPK1在酵母双杂交系统中无毒性及自激活活性。为深入研究BnMAPK1蛋白参与的生物学进程,从甘蓝型油菜中油821苗期根、茎、叶中分别提取总RNA,分离得到mRNA,利用SMART技术合成并纯化双链cDNA后建立甘蓝型油菜混合cDNA文库。以共转化法筛选与BnMAPK1相互作用的蛋白,对其分析与鉴定显示, BnMAPK1在生长发育、非生物及生物逆境、转录、蛋白合成及代谢、翻译及翻译后修饰等过程中起作用。研究结果为MAPKs级联,尤其是C族MAPKs的研究提供了新的视野,为甘蓝型油菜抗性的机理研究及分子育种奠定了重要的理论依据。
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| 收稿时间： | 2020-01-26 |
Prokaryotic expression,subcellular localization and yeast two-hybrid library screening of BnMAPK1 in B. napus |
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| Authors: | WANG Zhen YAO Meng-Nan ZHANG Xiao-Li QU Cun-Min LU Kun LI Jia-Na LIANG Ying |
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| Institution: | College of Agronomy and Biotechnology, Southwest University / Chongqing Engineering Research Center for Rapeseed / Academy of Agricultural Sciences, Southwest University, Chongqing 400715, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Brassica napus BnMAPK1 prokaryotic expression subcellular localization yeast two-hybrid |
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