小麦ERF转录因子W17互作蛋白的筛选和解析

来自小麦的ERF转录因子W17基因参与胁迫应答，过表达W17可显著提高转基因拟南芥的抗旱性和抗病性。本研究构建了小麦cDNA文库，通过酵母双杂技术筛选W17的互作蛋白，以期进一步解析ERF蛋白的作用机制。将pGBKT7-W17质粒、pGADT7和小麦文库混合转入酵母细胞AH109，在SD/–Trp/–Leu/–His/–Ade营养缺陷型平板上培养，挑选直径大于2 mm的克隆，在SD/Raf/Gal/X-gal平板上划线培养，筛选蓝色克隆。将筛出的克隆测序、BLAST分析，得到4类与W17相互作用的候选蛋白，分别是胁迫相关功能蛋白、翻译后修饰蛋白、1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)大亚基/小亚基以及功能未知蛋白。互作验证表明，Hsp90和PPR蛋白与W17有相互作用关系。这些候选蛋白参与信号转导或免疫过程，暗示W17在植物的逆境信号转导、下游基因转录调控，甚至在翻译过程都有重要作用。