丝瓜18S rRNA基因克隆及其作为内参基因的应用 |
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引用本文: | 朱海生,陈敏氡,温庆放,蓝新隆,李永平,王彬,张前荣,吴卫东.丝瓜18S rRNA基因克隆及其作为内参基因的应用[J].核农学报,2016(1):35-41. |
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作者姓名: | 朱海生 陈敏氡 温庆放 蓝新隆 李永平 王彬 张前荣 吴卫东 |
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作者单位: | 1. 福建省农业科学院作物研究所,福建福州350013;福建省农业科学院蔬菜研究中心,福建福州350013;福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013;2. 福建省农业科学院作物研究所,福建福州,350013;3. 福建省种植业技术推广总站,福建福州,350003 |
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基金项目: | 福建省属公益类科研院所基本科研专项,福建省农业科学院瓜类育种科技创新团队 |
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摘 要: | 选择合适的内参基因是提高实时荧光定量PCR分析(q RT-PCR)准确性的重要条件。18S r RNA基因表达范围广、表达量恒定,常作为内参基因应用于实时荧光定量PCR中。为了获得丝瓜18S r RNA基因,并设计合适的荧光定量PCR内参引物,解决丝瓜实时荧光定量PCR检测中无内参基因的现状,通过PCR和序列测定,首次克隆到了丝瓜的18S r RNA基因序列,其长度为1 862 bp,Gen Bank登录号为KM656452。在此基础上设计1对荧光定量PCR引物,该引物特异性强,扩增效率高,在丝瓜各生长发育阶段及各种非生物胁迫条件下均能稳定表达,适合在丝瓜基因表达研究中作为内参基因。该研究结果可为开展丝瓜重要功能基因的表达模式和调控机制的研究奠定基础。
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关 键 词: | 丝瓜 18S rRNA 内参基因 实时荧光定量PCR |
Cloning of 18S rRNA Gene From Luffa cylindrical and Its Application as an Internal Standard |
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Abstract: | |
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Keywords: | Luffa cylindrical 18S rRNA reference gene qRT-PCR |
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