共培养条件对农杆菌转化大豆子叶节的影响 |
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引用本文: | 李桂兰,刘晨光,乔潇,杨晓倩,王迪,乔亚科.共培养条件对农杆菌转化大豆子叶节的影响[J].核农学报,2014(9). |
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作者姓名: | 李桂兰 刘晨光 乔潇 杨晓倩 王迪 乔亚科 |
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作者单位: | 河北科技师范学院生命科技学院;河北科技师范学院物理系; |
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基金项目: | 转基因生物新品种培育科技重大专项(20142X08004-004B);河北省科技支撑计划(11220107D);河北省自然基金(C2014407051) |
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摘 要: | 为提高大豆的遗传转化效率,利用根癌农杆菌对大豆成熟种子的子叶节进行遗传转化,从影响农杆菌和大豆子叶节外植体双方的因素出发,重点研究共培养阶段培养基的pH值、光照条件和共培养时间三个因素对转化的影响,以寻找适宜农杆菌和外植体的平衡点。分析单因素试验和正交试验的研究结果表明,在共培养阶段,培养基pH值适宜范围为6.0~6.6,pH值以6.6为佳;提供10~16h·d-1光照均提高了转化效率,与完全黑暗差异显著;延长共培养时间显著提高转化效率,以7~10d为宜。本研究范围内以冀豆12、豫豆22和秦黄小粒12三个基因型大豆获得了较高转化效率,供试的6个大豆品种均获得了转基因植株,PCR和Southern分析表明植酸酶基因phyA基因已经整合到大豆基因组中。该结果对提高大豆的遗传转化效率有重要参考价值。
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关 键 词: | 农杆菌 大豆子叶节 共培养基pH值 共培养时间 共培养光照 |
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