贮藏期猕猴桃果实表面溃疡病病原菌的快速检测方法研究 |
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引用本文: | 朱丹,曹凡,高贵田,王铎,徐雅芬,杜莹琳,张鑫,李朝正,孙强.贮藏期猕猴桃果实表面溃疡病病原菌的快速检测方法研究[J].核农学报,2017,31(3). |
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作者姓名: | 朱丹 曹凡 高贵田 王铎 徐雅芬 杜莹琳 张鑫 李朝正 孙强 |
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作者单位: | 1. 陕西师范大学食品工程与营养科学学院,陕西西安,710119;2. 陕西师范大学食品工程与营养科学学院,陕西西安710119;陕西省猕猴桃工程技术研究中心,陕西西安710404 |
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摘 要: | 为建立猕猴桃果实表皮溃疡病病原菌(Psa)的快速检测方法,以陕西周至县贮藏期的海沃德猕猴桃为材料,用King’s B液体培养基培养获得果实表面病原菌,采用细菌DNA提取试剂盒及热裂解法提取总DNA;根据陕西猕猴桃Psa的hrp W保守区设计2对特异引物进行巢式PCR扩增,并对扩增产物进行测序。结果表明,从4个猕猴桃贮藏库抽取40个样品,其中8个样品检测出阳性扩增;对特异扩增得到的550bp的hrp W序列进行BLAST对比分析,发现该序列与丁香假单胞杆菌猕猴桃致病性变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)的hrp W序列同源性为99%。此外,本试验建立的巢式PCR检测方法对Psa的检出限为103cfu·m L~(-1),检测方法特异性强,灵敏度高,能减少假阳性的出现,保证了快速检测结果的可靠性,为控制猕猴桃果实传播Psa提供了理论依据。
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关 键 词: | 猕猴桃溃疡病 丁香假单胞杆菌猕猴桃致病性变种 巢式PCR hrpW |
Research of Rapid Detection on Pseudomonas syringae pv.actinidiae From the Surface of Kiwifruit During the Storage Period |
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Abstract: | |
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Keywords: | kiwifruit bacterial canker Pseudomonas syringe pv actinidiae nest-PCR hrpW |
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