用丝心蛋白轻链基因构建转基因家蚕基因打靶载体 |
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引用本文: | 朱成钢,金勇丰,史锋,金荣仲,吴玉澄,张耀洲.用丝心蛋白轻链基因构建转基因家蚕基因打靶载体[J].农业生物技术学报,2002,10(2):171-175. |
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作者姓名: | 朱成钢 金勇丰 史锋 金荣仲 吴玉澄 张耀洲 |
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作者单位: | 1. 浙江大学生物化学研究所,杭州,310029;浙江大学动物科学学院蚕蜂系,杭州,310029 2. 浙江大学生物化学研究所,杭州,310029 3. 浙江大学动物科学学院蚕蜂系,杭州,310029 |
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摘 要: | 家蚕(Bombyx mori)的丝心蛋白启动子是自然界中最强的启动子之一,若能使外源基因在丝心蛋白启动子控制下得到重要的意义。研究从天蛹中提取家蚕基因组DNA,用PCR的方法克隆了丝心蛋白轻链基因的5kb和0.5kb两个片段。DNA序列分析表明,不同蚕品种2-7外显子范围内DNA序列源性达95.7%。用PCR的方法在GFP基因前端加上凝血酶的识别序列,并克隆到轻链基因的5kb和0.5kb两个片段中间,使GFP基因具有正确的读码框,能和轻链蛋白融合表达。将这一融合的DNA大片段克隆到pBacPAK8转移载体上,构建成一种新型的转基因家蚕打靶载体pBacFL53TG,用于家蚕丝腺生物反应器的研究。
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关 键 词: | 丝心蛋白轻链基因 转基因家蚕 基因打靶 载体 绿色荧光蛋白 |
修稿时间: | 2001年7月17日 |
Construction of Transgenic Silkworm Gene Targeting Vectors Based on Fibroin Light Chain |
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Abstract: | |
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