| 棉铃虫法胱氨酸蛋白酶底物特异性研究 |
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| 引用本文： | 李斐雪,李照民,张志宏,徐夏莲,赵小凡,王金星.棉铃虫法胱氨酸蛋白酶底物特异性研究[J].农业生物技术学报,2001,9(2):152-155. |
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| 作者姓名： | 李斐雪 李照民 张志宏 徐夏莲 赵小凡 王金星 |
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| 作者单位： | 山东大学生命科学院 |
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| 基金项目： | 该课题受国家自然科学基金资助,项目号:39740024,39870095 |
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| 摘 要： | 为了研究棉铃虫（Helicoverpa armigera）半胱氨酸蛋白酶的底物专一性，进一步阐明该蛋白酶的性质和应用前景，从棉铃虫卵巢中 化了该蛋白酶，用电泳方法检测了该蛋白酶对牛血红蛋白（Hb）、牛血清蛋白（BSA）、卵黄磷蛋白（Vn）、明胶（gelatin）等4种动物蛋白，及大事产、玉米、马铃薯、豇豆、向阳花种子及棉籽蛋白等6种植物蛋白的水解作用，结果显示该酶对4种埃6种植物蛋白都有明显水解活性。用吸光度测定法测定了棉铃虫半胱氨酸蛋白酶对牛血红蛋白，牛血清蛋白、卵磷蛋白、明胶等4种底物的米氏常数（Km）值。结果显示棉铃虫半胱氨酸蛋白酶对牛血红蛋白和卵磷蛋白的水解产物的吸光度值较高，而对牛血清蛋白和明胶的水解产物的吸光度值较低。 测得该蛋白酶对牛血红蛋白、牛血清蛋白的水解产物的吸光度值较高，而对牛血清蛋白和明胶的水解产物的吸光度值较低。测得该蛋白酶对牛血红蛋白、牛血清蛋白、卵黄磷蛋白、明胶的Km值分别为10、0.91、0.08μmol/L和250mg/L，其中对卵黄磷蛋白的Km值最小，说明棉铃虫半胱氨酸蛋白酶与卵黄磷蛋白的亲和力量大，即卵黄磷蛋白是棉铃虫半胱氨酸蛋白酶的最适底物，同时用电泳方法检测了该蛋白酶对粗提的棉铃虫卵黄磷蛋白的水解作用，结果显示该酶对其有明显水解活性，由此推测该酶可能参与棉铃虫胚胎发育中卵磷蛋白的水解。
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| 关 键 词： | 棉铃虫 胱氨酸蛋白酶 底物特异性 Km值 |
| 修稿时间： | 2000年8月5日 |
Substrate Specificity of A Cysteine Proteinase From Eggs of the Cotton Boll Worm,
Helicoverpa armigera |
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