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利用噬菌体随机肽库筛选传染性法氏囊病病毒VP2模拟表位
引用本文:王小娥,杨春晓,朱彩霞,孙寅剑,崔金生,肖海君,朱瑞良.利用噬菌体随机肽库筛选传染性法氏囊病病毒VP2模拟表位[J].农业生物技术学报,2010,18(3):573-579.
作者姓名:王小娥  杨春晓  朱彩霞  孙寅剑  崔金生  肖海君  朱瑞良
作者单位:1. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;瑞普(天津)生物药业有限公司,天津,300300
2. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;济宁市畜牧兽医局,济宁,272037
3. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018
基金项目:国家自然科学基金,山东省博士后科研项目择优基金、山东省科技攻关项目,高等学校博士学科点专项科研基金,国家人事部博士后基金和山东省优秀中青年科学家科研奖励基金 
摘    要:用纯化的4株传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2单克隆抗体(1B5,5D1,2H11和I4-4-3)筛选噬菌体随机12肽库,对40个克隆(10个单克隆噬菌斑×4株单克隆抗体)进行ELISA验证,获得32个阳性克隆,选20个阳性克隆(5个单克隆噬菌斑×4株单克隆抗体)进行DNA序列分析,确定了4个优势12肽为不同传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗原表位.这4个12肽在一级结构上没有3个以上连续氨基酸与GenBank中传染性法氏囊病病毒、VP2的氨基酸序列相同之处,与单抗的结合可被VP2蛋白有效地抑制,推测可能是构象依赖性表位.将4个模拟表位串联表达后获得目的蛋白,经SDS-PAGE分析,目的蛋白占菌体总蛋白的20%,分子量30 kD.用多克隆抗体对目的蛋白进行免疫印迹分析,结果表明目的蛋白具有特异性和反应原性.试验结果提示:筛选的是传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2单抗的模拟表位.

关 键 词:模拟表位  噬菌体随机12肽库  噬菌体展示技术

Screening of Mimic Epitopes for Infectious Bursal Disease Virus VP2 by Phage Display Random Peptide Library
Wang Xiaoe,Yang Chunxiao,Zhu Caixia,Sun Yinjian,Cui Jinsheng,Xiao Haijun,Zhu Ruiliang.Screening of Mimic Epitopes for Infectious Bursal Disease Virus VP2 by Phage Display Random Peptide Library[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2010,18(3):573-579.
Authors:Wang Xiaoe  Yang Chunxiao  Zhu Caixia  Sun Yinjian  Cui Jinsheng  Xiao Haijun  Zhu Ruiliang
Abstract:
Keywords:
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