| 奶山羊ELOVL6基因启动子的克隆及活性区域分析 |
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| 引用本文： | 赫秋亚,罗军,姚大为,赵博,王苗,许会芬,王会,史怀平.奶山羊ELOVL6基因启动子的克隆及活性区域分析[J].农业生物技术学报,2016(6):790-798. |
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| 作者姓名： | 赫秋亚 罗军 姚大为 赵博 王苗 许会芬 王会 史怀平 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物科技学院/陕西省农业分子生物学重点实验室,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 转基因生物新品种培育项目(No.2014ZX08009-051B)、公益性行业(农业)科研专项(No.201103038)和陕西省国际科技合作重点项目计划(No.2014KW14-02) |
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| 摘 要： | 超长链脂肪酸延伸酶6(elongase of very long chain fatty acids 6,ELOVL6)主要催化C12～C16饱和或单不饱和脂肪酸的延伸,是长链脂肪酸延长反应的限速酶.本研究根据云南黑山羊(Capra hircus)的基因组序列(Gene ID:NW_005100691.1)设计引物,以血液DNA为模板,利用PCR技术扩增得到西农萨能奶山羊(C.hircus)ELOVL6基因启动子的全长序列,通过缺失分析,构建了10个包含ELOVL6启动子不同缺失片段的荧光素酶报告基因载体,与海肾荧光素酶对照报告基因载体(pRL-TK)共同转染西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞,利用双荧光素酶系统检测不同片段的启动子活性.结果表明,克隆得到ELOVL6基因启动子全长序列2 370 bp(包含转录起始位点上游2 168 bp),其与牛(Bos taurus)、人(Homo sapiens)和鼠(Mus musculus)的基因组序列同源性分别为94％、81％和80％,LO VL6启动子上无典型的真核生物启动转录元件TATA框.缺失突变研究发现,ELOVL6基因启动子前端存在负调控元件,启动子核心区域位于转录起始位点上游109～40 bp,该序列包含过氧化酶体增殖物激活受体(peroxisom prolifeator-activated receptor,PPAR)、肝X受体(liver X receptor,LXR)、胆固醇调节元件结合蛋白-1 (sterol-regulatory element binding protein-1,SREBP-1)、特异性蛋白1(specificity protein 1,Sp1)及核因子Y(nuclear factor Y, NF-Y)等转录因子的结合位点,本研究为ELOVL6基因启动子的功能研究提供理论依据.
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| 关 键 词： | 超长链脂肪酸延伸酶6(ELOVL6) 启动子 基因克隆 西农萨能奶山羊 |
Cloning and Activity Analysis of ELOVL6 Gene Promoter of Dairy Goat (Capra hircus) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Elongase of very long chain fatty acids 6 (ELOVL6) Promoter Gene cloning Xinong Saanen dairy goat |
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