| 多重连接探针扩增(MLPA)技术同时检测五种病毒的研究 |
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| 引用本文： | 史喜菊,马贵平,乔彩霞,郭志红,张伟,刘全国,李炎鑫,李冰玲.多重连接探针扩增(MLPA)技术同时检测五种病毒的研究[J].农业生物技术学报,2013,21(6):745-752. |
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| 作者姓名： | 史喜菊 马贵平 乔彩霞 郭志红 张伟 刘全国 李炎鑫 李冰玲 |
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| 作者单位： | 1. 北京出入境检验检疫局,北京,100026
2. 北京市兽药监察所,北京,100012 |
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| 基金项目： | 国家质量监督检验检疫总局课题 |
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| 摘 要： | 现有的动物疫病诊断技术多是针对单一病原进行的,而动物疫病的流行却出现了多种病毒混合感染,现有诊断技术不能很好地满足国境口岸快速、高通量检疫的需求,动物疫病多重检测新技术的研究近来已经成为动物疫情监测、疫病控制领域关注的焦点。本研究利用多重连接探针扩增(MLPA)技术特异、敏感、高通量等技术优势,以猪流感病毒(SIV)、伪狂犬病病毒(PRV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪传染性胃肠炎(TGEV)和猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)为研究对象,分别设计了这5种病毒的MLPA探针,将这5种探针混合,建立了可以同时检测这5种病毒的MLPA扩增方法。方法特异性试验表明,针对每种病毒的探针都只能扩增出其对应的病毒模板,其余病毒模板的扩增都是阴性结果;而且,5种探针混合物都只能从单个目的病毒中扩增出单一的特异性条带,而猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的扩增均为阴性。敏感性试验结果表明,5重MLPA扩增的最低检测限可以达到单个病毒核酸3000~6000个拷贝。本研究建立的5种病毒MLPA检测方法在国内外首次实现一次采样,一次分析,检测5种猪病的目的,该技术特异性强,敏感性高,加之其多重性检测优势,有望成为未来疫病检测的新方向。
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| 关 键 词： | 多重连接探针扩增(MLPA)技术 5种病毒 同时检测 |
Simultaneous Detection of Five Virues by Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification(MLPA) Technology |
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| SHI Xi-Ju,MA Gui-Ping,QIAO Cai-Xia,GUO Zhi-Hong,ZHANG Wei,LIU Quan-Guo,LI Yan-Xin,LI Bing-Ling.Simultaneous Detection of Five Virues by Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification(MLPA) Technology[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2013,21(6):745-752. |
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| Authors: | SHI Xi-Ju MA Gui-Ping QIAO Cai-Xia GUO Zhi-Hong ZHANG Wei LIU Quan-Guo LI Yan-Xin LI Bing-Ling |
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| Institution: | 1 Beijing Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau,Beijing 100026,China;2 Beijing Institute of Veterinary Drug Control,Beijing 100012,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Multiplex ligation-dependent probe amplification(MLPA) Five viruses Simultaneous detection |
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